吉妮歐提供ELISPOT分析檢測服務(wù)助力疫苗研發(fā)
發(fā)布時間：
2024-12-23
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ELIspot（酶聯(lián)免疫斑點檢測）是一種結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA）的實驗方法，用于檢測單個細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子。該技術(shù)使用涂有特定抗體的膜來捕獲細(xì)胞因子，通過酶聯(lián)斑點顯色的方式展示結(jié)果。
ELISpot 實驗原理圖 來源于Janetzki S, Price L, Schroeder H, Britten CM, Welters MJ, Hoos A. Guidelines for the automated evaluation of Elispot assays. Nat Protoc. 2015 Jul;10(7):1098-115. doi: 10.1038/nprot.2015.068. Epub 2015 Jun 25. PMID: 26110715.
ELIspot 實驗大致流程
1. 膜準(zhǔn)備
使用PVDF膜為底的96孔板，包被特定的單克隆抗體。
2. 細(xì)胞培養(yǎng)
• 向孔內(nèi)添加待檢測的細(xì)胞和抗原刺激物進(jìn)行培養(yǎng)。
• 在刺激下，細(xì)胞會分泌相應(yīng)的細(xì)胞因子，這些因子被膜上的抗體所捕獲。
3. 洗滌與檢測
• 洗去細(xì)胞后，被捕獲的細(xì)胞因子與生物素標(biāo)記的第二抗體結(jié)合。
• 使用酶標(biāo)記的親和素與生物素結(jié)合，進(jìn)行化學(xué)酶聯(lián)顯色，形成圓形斑點。
4. 數(shù)據(jù)分析
統(tǒng)計膜上斑點的數(shù)量，并將其除以初始細(xì)胞的總數(shù)，以計算陽性細(xì)胞的百分比。
ELISpot實驗結(jié)果圖與對應(yīng)統(tǒng)計表格
ELIspot 技術(shù)特點
高靈敏度：在一百萬個陰性細(xì)胞中，可以檢測到一個陽性細(xì)胞，靈敏度比傳統(tǒng)ELISA高2-3個數(shù)量級。
單細(xì)胞水平：檢測活細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，而非細(xì)胞群體的平均分泌，有效評估活細(xì)胞功能。
操作簡便與經(jīng)濟(jì)：無需復(fù)雜的細(xì)胞體外擴(kuò)增過程，無同位素使用，也不需要大型專用設(shè)備，能夠處理大量樣品，提高檢測效率。
ELIspot技術(shù)廣泛應(yīng)用于：
• 感染性和腫瘤疫苗的臨床藥效學(xué)評估
• 免疫原性檢測：影響CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增和存續(xù)的重要因素。
• 藥物篩選：評估基因治療產(chǎn)品安全性和有效性的重要指標(biāo)。
通過ELIspot技術(shù)，研究人員可以獲得更準(zhǔn)確、有效的細(xì)胞因子分泌信息，為疫苗開發(fā)和免疫療法研究提供了重要工具。
案 例 展 示
乙肝mRNA疫苗動物模型-Elispot-T細(xì)胞檢測
乙肝mRNA疫苗動物模型-Elispot-HBsAb
吉妮歐生物擁有豐富的細(xì)胞資源和動物模型，可提供多種體外細(xì)胞檢測服務(wù)，我們在這領(lǐng)域積累了豐富經(jīng)驗和大量的實驗數(shù)據(jù)。
為助力疫苗研發(fā)，吉妮歐生物可提供ELISpot分析檢測服務(wù)，根據(jù)客戶的不同需求，設(shè)計合適的方案，提供有效的方法學(xué)驗證，出具個性化的分析結(jié)果報告，不僅可以為客戶提供一站式ELISpot分析檢測服務(wù)，也可為有需求的客戶提供讀板服務(wù)。
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