人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞系原代培養(yǎng)取材注意事項(xiàng)及要求 這些你都清楚嗎？
發(fā)布時(shí)間：
2021-12-09
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類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是臨床常見(jiàn)的慢性炎性自身免疫性疾病,以多關(guān)節(jié)炎癥、滑膜增生和骨侵蝕為基本特征。吉妮歐提供 人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞系的原代培養(yǎng)技術(shù)及銷(xiāo)售代購(gòu)相關(guān)服務(wù)，也可幫忙代做細(xì)胞建系。如有需要的同學(xué)請(qǐng)來(lái)電或在線預(yù)約！
滑膜炎癥伴大量血管翳形成是導(dǎo)致RA骨侵蝕、關(guān)節(jié)破壞的主要原因。疾病過(guò)程中,異常的血管新生是滑膜增生和血管翳形成的病理基礎(chǔ)。調(diào)節(jié)血管新生的因子有許多種,其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是最重要的因子之一;其次,基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)也對(duì)血管翳的增生有重要作用。
原代細(xì)胞的取材
人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的第一步，若取材不當(dāng)，將會(huì)直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)，現(xiàn)將取材的基本要求和注意事項(xiàng)敘述如下：
取材的基本要求
?。?）取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養(yǎng)成功，取材時(shí)應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細(xì)胞，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時(shí)培養(yǎng)，應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，于4℃存放。若組織塊較大，應(yīng)在清除表面血塊、壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時(shí)間不能超過(guò)24h。對(duì)于已切碎的組織或血液、淋巴組織應(yīng)加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基，按細(xì)胞凍存方式于液氮中冷凍保存。
（2）取材應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌 所取標(biāo)本材料應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，為了確保無(wú)菌，對(duì)所取材料若疑有污染的可能，應(yīng)將所取組織在含高濃度抗菌素（400單位/mL）甚至加入適量的兩性霉素B或10%達(dá)克寧液的培養(yǎng)液內(nèi)于4℃下存放2小時(shí)以上，再用PBS洗2~3次，以確保所取材料無(wú)菌。要用無(wú)菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液（內(nèi)含400單位/mL抗菌素）的小瓶等便于攜帶的物品來(lái)取材，所取材料應(yīng)避免接觸有毒有害的化學(xué)物質(zhì)，如碘、汞等。
（3）取材和原代細(xì)胞制作時(shí)，要用鋒利的器械，如手術(shù)刀或剃須刀片切碎組織，盡可能減少對(duì)細(xì)胞的機(jī)械損傷。
?。?）要仔細(xì)去除所取材料上的血液（血塊）、脂肪、壞死組織及結(jié)締組織，切碎組織時(shí)應(yīng)避免組織干燥，可在含少量培養(yǎng)液的器皿中進(jìn)行。
?。?）取材應(yīng)注意組織類(lèi)型、分化程度、年齡等，一般來(lái)講，胚胎組織較成熟個(gè)體組織容易培養(yǎng)，分化低的較分化高的組織容易生長(zhǎng)，腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng)。取材時(shí)應(yīng)盡量選用易培養(yǎng)的組織進(jìn)行培養(yǎng)。
（6）原代細(xì)胞取材時(shí)要同時(shí)留好組織學(xué)標(biāo)本和電鏡標(biāo)本。對(duì)組織的來(lái)源、部位、包括供體的一般情況要做詳細(xì)的記錄，以備以后查詢(xún)
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