復(fù)方五鳳草液通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞M1、M2的極化發(fā)揮"泄毒生新"作用，促進慢性難愈性創(chuàng)面的修復(fù)

發(fā)布時間：

2022-06-17

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專業(yè)提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB細(xì)胞庫源細(xì)胞、動物實驗、CRO服務(wù)、SCI潤色)

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本實驗通過構(gòu)建巨噬細(xì)胞模型，建立慢性難愈性創(chuàng)面大鼠動物模型，觀察復(fù)方五鳳草液對巨噬細(xì)胞極化的影響及與創(chuàng)面愈合之間的關(guān)聯(lián)，探索復(fù)方五鳳草液泄毒生新的機制

　　摘要
　　慢性難愈性創(chuàng)面的修復(fù)是臨床上常見的難題，創(chuàng)面通常深達(dá)真皮和皮下組織，且面積較大，病程遷延，是一種長期消耗性疾病，有很高的致殘率。長期不愈合的創(chuàng)面甚至?xí)邪┳兊娘L(fēng)險，造成嚴(yán)重后果。且慢性創(chuàng)面的患者多合并有糖尿病、高血壓病等基礎(chǔ)疾病，手術(shù)治療風(fēng)險大。
　　中醫(yī)藥在創(chuàng)面修復(fù)方面具有獨特而鮮明的優(yōu)勢。慢性創(chuàng)面屬于中醫(yī)"瘡瘍"范疇，結(jié)合多年的臨床實踐，提出泄毒生新法，并自創(chuàng)復(fù)方五鳳草液，在對多種慢性創(chuàng)面臨床治療中效果顯著。
　　在下肢靜脈性，燒傷性，壓力性以及糖尿病創(chuàng)面的4種大鼠動物模型上得到了驗證，對于復(fù)方五鳳草液具體的作用機制尚不清楚。
　　本實驗通過構(gòu)建巨噬細(xì)胞模型，建立慢性難愈性創(chuàng)面大鼠動物模型，觀察復(fù)方五鳳草液對巨噬細(xì)胞極化的影響及與創(chuàng)面愈合之間的關(guān)聯(lián)，探索復(fù)方五鳳草液泄毒生新的機制。
　　目的
　　觀察復(fù)方五鳳草液對創(chuàng)面愈合和巨噬細(xì)胞極化的影響，探究其泄毒生新的機制。
　　方法
　　人單核系 U937 細(xì)胞經(jīng)PMA誘導(dǎo)成為MO型巨噬細(xì)胞，采用LPS/IFN-y和IL-4/ⅡL-13誘導(dǎo)成為 M1和M2型巨噬細(xì)胞，加入1.0、1.5、2.0 mg/mL 復(fù)方五鳳草液進行處理，采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞膜表面CD86、CD206 的表達(dá)，采用免疫印跡法檢測Arg-1、iNOS蛋白表達(dá)，ELISA法檢測上清液中 TNF-α、TGF-β水平。建立大鼠難愈性創(chuàng)面模型，對照組采用凡士林處理，治療組采用復(fù)方五鳳草液處理，在第1、3、7、14 天記錄創(chuàng)面愈合率、肉芽量和腐肉量，并取創(chuàng)面肉芽組織，采用實時熒光定量法檢測組織勻漿中 Arg-1、iNOS的 mRNA 表達(dá)，ELISA 法檢測TNF-α、TGF-β水平。
　　結(jié)果

　　不同劑量復(fù)方五鳳草液對 M1型標(biāo)志分子iNOS、TNF-α、CD86 的表達(dá)無影響;能上調(diào) M2型標(biāo)志分子Arg-1、TGF-β、CD206 的表達(dá)。與對照組比較，復(fù)方五鳳草液能提高創(chuàng)面的肉芽量和愈合率，降低創(chuàng)面的腐肉量，降低 iNOS和 TNF-α 的表達(dá)，提高 Arg-1和TGF-β的表達(dá)。
　　結(jié)論
　　復(fù)方五鳳草液通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞M1、M2的極化發(fā)揮"泄毒生新"作用，促進慢性難愈性創(chuàng)面的修復(fù)。
　　關(guān)鍵詞
　　復(fù)方五鳳草液∶慢性難愈性創(chuàng)面∶巨噬細(xì)胞極化∶泄毒生新