連花清瘟顆粒對甲型 H1N1 流感病毒性肺炎小鼠肺組織的保護效果及作用機制
發布時間：
2022-06-21
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摘要
作為威脅人類健康的傳染性疾病之一，流行性感冒（簡稱流感）不僅發病率高，同時還有高傳染率、高病死率的特點，尚不能得到有效控制。
我國是流感高發國家之一，我國流感病死率較高，1997 年暴發的H5N1流感病死率高達66%～80%;2009年新型甲型 H1N1 流感暴發，因其發病急，傳播范圍廣，影響了全球 200 多個國家和地區;目前流感的治療方式主要為抗病毒治療，疫苗接種的保護率低，且成本較高。（推薦閱讀：LPS誘導的肺損傷模型小鼠、小鼠模型、801-D人大細胞肺癌）
甲型 H1N1流感病毒已經成為引起重癥肺炎的病原體之一，而且甲型 H1N1 流感病毒感染導致的重癥肺炎往往容易進展為急性呼吸窘迫綜合征，因此，開展抗甲型 H1N1流感病毒藥物的研究仍具有重要意義。臨床常將連花清瘟顆粒用于上呼吸道感染的治療，在新型冠狀病毒肺炎疫情發生后，連花清瘟顆粒也被用來預防及治療新型冠狀病毒肺炎，并且取得了較好的治療效果，其可以廣譜抗病毒，通過調節多種信號通路抑制病毒對細胞的侵襲。
研究發現，在甲型 H1N1 流感病毒入侵機體的早期，機體會應激產生干擾素，干擾素可與細胞膜特異性受體（IFNAR）結合，激活 Ja-nus激酶（JAK）/信號轉導及轉錄激活因子（STAT）信號通路，使肺炎加重，本研究旨在基于JAK/STAT 信號通路，探究連花清瘟顆粒對甲型 H1N1 流感病毒性肺炎小鼠動物模型肺組織的保護效果及作用機制。
目的
基于Janus 激酶（JAK/信號轉導及轉錄激活因子（STAT））信號通路，探討連花清瘟顆粒對甲型H1N1流感病毒性肺炎小鼠動物模型肺組織的保護效果及機制。
方法
使用不同稀釋倍數的甲型 日H1N流，感病毒液感染 BALB/c小鼠，觀察小鼠存活率及肺水腫嚴重程度，從而確定造模病毒稀釋倍數。設置模型組（HN組）、連花清瘟顆粒組（LC組）及對照組，各 10只。LC組予連花清瘟顆粒（5 g/kg）溶液灌胃5 d后，滴鼻感染甲型 H1N1流感病毒，然后持續給藥干預5 d;H1N1 組滴鼻感染甲型H1N1流感病毒，對照組用與造模病毒液同體積的生理鹽水滴鼻;在LC組給藥的同時，H1N1 組與對照組均用同體積生理鹽水灌胃。
觀察各組小鼠健康狀態，采用實時熒光定量 PCR 檢測小鼠肺組織JAK1、STAT3 mRNA表達水平，觀察肺組織病理學變化，采用Western blot檢測小鼠肺組織JAK1、STAT3蛋白表達水平，采用 ELISA 檢測小鼠血清 IgG 水平。
結果
確定使用稀釋倍數為 100的病毒液進行造模。與對照組比較，H1N1組、LC組 JAK1、STAT3 mRNA表達水平明顯升高，而相較于H1N1 組，LC組JAK1、STAT3 mRNA表達水平明顯降低，差異有統計學意義（P<0.05）。對照組小鼠肺組織正常;H1N1組小鼠肺組織出現充血、水腫現象，同時發生彌漫性炎癥細胞浸潤，伴有上皮細胞脫落、壞死，發現支氣管上皮細胞變形;LC組小鼠相較 H1N1組小鼠肺組織水腫、充血現象減輕，炎癥細胞浸潤明顯減少，肺部病變得到緩解。與對照組比較，H1N1組小鼠肺組織 JAK1、STAT3 蛋白表達水平明顯升高，差異有統計學意義（P<0.05）。H1N1組小鼠血清IgG水平明顯高于對照組，LC組小鼠血清IgG水平明顯高于對照組、H1N1組，差異有統計學意義（P<0.05）。
結論
連花清瘟顆粒可以抑制甲型 H1N1 流感病毒性肺炎小鼠體內JAK/STAT信號通路，增強小鼠免疫力，減少小鼠肺組織損傷。
關鍵詞
激酶/信號轉導及轉錄激活因子信號通路; 連花清瘟顆粒; 甲型H1N1流感病毒; 動物實驗
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