鼻炎臨床療效安全性評(píng)價(jià)及相關(guān)機(jī)制的小鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間：

2022-07-15

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評(píng)價(jià)穴位埋線治療變應(yīng)性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的臨床療效和安全性，探討穴位埋線對(duì)變應(yīng)性鼻炎機(jī)體鼻戮膜神經(jīng)源性炎癥及免疫相關(guān)基因表達(dá)譜的調(diào)節(jié)作用，從臨床和基礎(chǔ)兩方面為為穴位埋線治療AR的臨床運(yùn)用提供科學(xué)依據(jù)

　　目的
　　評(píng)價(jià)穴位埋線治療變應(yīng)性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的臨床療效和安全性，探討穴位埋線對(duì)變應(yīng)性鼻炎機(jī)體鼻戮膜神經(jīng)源性炎癥及免疫相關(guān)基因表達(dá)譜的調(diào)節(jié)作用，從臨床和基礎(chǔ)兩方面為為穴位埋線治療AR的臨床運(yùn)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法
　　采用隨機(jī)、盲法、對(duì)照的臨床研究方法，通過(guò)EXCEL軟件RAND函數(shù)產(chǎn)生隨機(jī)數(shù)字，將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的128名AR受試者分為A組(穴位埋線組)和B組(穴
　　位假埋線組)。兩組均采用相同的取穴方案，每位受試者共接受兩次穴位埋線/假埋線治療，兩次治療間隔2周。以視覺(jué)模擬評(píng)分量表(visual analogue scale VAS )積分及鼻眼結(jié)膜相關(guān)生活質(zhì)量問(wèn)卷調(diào)查量表(Rhinocoujunctivitis Quality of Life Questionaire )積分為主要的療效評(píng)價(jià)指標(biāo)，以鼻內(nèi)鏡檢查，以及血清特異性IgE. IL-4. IL-10. II,-12. IFN一及VCAM-1等實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)作為第二療效評(píng)價(jià)指標(biāo)，治療期間的合并用藥情況、受試者的不良反應(yīng)也將被記錄。在治療前、治療結(jié)束后4周(血清學(xué)指標(biāo)該時(shí)間點(diǎn)未行檢測(cè))、治療后8周不同時(shí)間點(diǎn)隨訪受試者，評(píng)價(jià)穴位埋線暇埋線的臨床療效及安全性。
　　以卵清蛋白致敏SD大鼠的方法制作變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型，分為治療組A和對(duì)照組B，另設(shè)空白組C。每組各15只SD大鼠。A組迎香穴(LI20)埋線，B組不行任何治療。A組大鼠行迎香穴穴位埋線治療。治療后10天，同時(shí)取各組大鼠鼻茹膜組織，行HE染色及感覺(jué)神經(jīng)}lC P物質(zhì)(substance P,SP)、降鈣素基因相關(guān)膚calcitoningene related peptide, CGRP)和神經(jīng)激膚A(neurokinin A, NKA)的免疫組織化學(xué)染色。觀察以下內(nèi)容:1)造模及治療期間大鼠變應(yīng)性鼻炎相關(guān)的行為學(xué)評(píng)分變化;2)光鏡下每張切片以嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)情況為主的炎癥病變情況;3)感覺(jué)神經(jīng)膚免疫組化染色情況及積分光密度值(iOD)的測(cè)定情況。
　　采用方法2中同樣的造模、分組及干預(yù)方法，每組SD大鼠各3只。A組大鼠第二次迎香穴埋線后取各組大鼠鼻茹膜，經(jīng)RNA抽提、純化、質(zhì)量檢測(cè)、cDNA合成后，以第二代功能分類Real-time PCR芯片一The Rat Inflammatory Response&Autoimmunity RTZ ProfilerTM PCR Array(含84個(gè)目標(biāo)基因)研究穴位埋線治療后鼻茹膜免疫相關(guān)基因表達(dá)譜的改變情況，并以△OCt方法進(jìn)行三組間兩兩比較的數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)論
　　1.穴位埋線及假埋線均有助于改善變應(yīng)性鼻炎患者的癥狀(VAS評(píng)分)及相關(guān)的生活質(zhì)量(RQLQ評(píng)分)。但穴位埋線組由于有埋入線體的持續(xù)刺激，該組受試者的癥狀(VAS評(píng)分)及相關(guān)的生活質(zhì)量(RQLQ評(píng)分)改善較假埋線組更持久。穴位埋線也有助于改善受試者的鼻勤膜顏色、鼻分泌物、下鼻甲的腫脹情況，以及受試者治療前后血清特異性IgE的表達(dá)情況，但對(duì)參與免疫反應(yīng)的其他細(xì)胞因子無(wú)改善作用。
　　2.穴位埋線可能通過(guò)改善感覺(jué)神經(jīng)膚參與的鼻腔神經(jīng)源性炎癥而減輕變應(yīng)性鼻炎的狀況。但穴位埋線治療的AR大鼠模型組，經(jīng)治療，癥狀雖較治療前緩解，但與空白組相比，組間感覺(jué)神經(jīng)膚的表達(dá)差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示雖然沒(méi)有明顯癥狀，但是翁膜的炎癥狀態(tài)仍在持續(xù)。
　　3.利用功能性分類基因芯片技術(shù)有的放矢地對(duì)穴位埋線治療的變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物的鼻豁膜的免疫相關(guān)基因表達(dá)譜進(jìn)行差異表達(dá)基因的篩選是可行的。與全基因表達(dá)譜芯片的研究相比，該方法能夠更為快速、準(zhǔn)確地篩選出目標(biāo)基因，進(jìn)而為穴位埋線治療變應(yīng)性鼻炎的治療方法提供理論依據(jù)，并為進(jìn)一步的研究指明方向。
　　關(guān)鍵詞
　　臨床療效評(píng)價(jià)，臨床安全性評(píng)價(jià)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，鼻炎動(dòng)物模型，大鼠動(dòng)物模型