鼻炎臨床療效安全性評價及相關機制的小鼠動物模型實驗研究
發布時間：
2022-07-15
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目的
評價穴位埋線治療變應性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的臨床療效和安全性，探討穴位埋線對變應性鼻炎機體鼻戮膜神經源性炎癥及免疫相關基因表達譜的調節作用，從臨床和基礎兩方面為為穴位埋線治療AR的臨床運用提供科學依據。
方法
采用隨機、盲法、對照的臨床研究方法，通過EXCEL軟件RAND函數產生隨機數字，將符合納入標準的128名AR受試者分為A組(穴位埋線組)和B組(穴
位假埋線組)。兩組均采用相同的取穴方案，每位受試者共接受兩次穴位埋線/假埋線治療，兩次治療間隔2周。以視覺模擬評分量表(visual analogue scale VAS )積分及鼻眼結膜相關生活質量問卷調查量表(Rhinocoujunctivitis Quality of Life Questionaire )積分為主要的療效評價指標，以鼻內鏡檢查，以及血清特異性IgE. IL-4. IL-10. II,-12. IFN一及VCAM-1等實驗室檢測指標作為第二療效評價指標，治療期間的合并用藥情況、受試者的不良反應也將被記錄。在治療前、治療結束后4周(血清學指標該時間點未行檢測)、治療后8周不同時間點隨訪受試者，評價穴位埋線暇埋線的臨床療效及安全性。
以卵清蛋白致敏SD大鼠的方法制作變應性鼻炎動物模型，分為治療組A和對照組B，另設空白組C。每組各15只SD大鼠。A組迎香穴(LI20)埋線，B組不行任何治療。A組大鼠行迎香穴穴位埋線治療。治療后10天，同時取各組大鼠鼻茹膜組織，行HE染色及感覺神經}lC P物質(substance P,SP)、降鈣素基因相關膚calcitoningene related peptide, CGRP)和神經激膚A(neurokinin A, NKA)的免疫組織化學染色。觀察以下內容:1)造模及治療期間大鼠變應性鼻炎相關的行為學評分變化;2)光鏡下每張切片以嗜酸性粒細胞浸潤情況為主的炎癥病變情況;3)感覺神經膚免疫組化染色情況及積分光密度值(iOD)的測定情況。
采用方法2中同樣的造模、分組及干預方法，每組SD大鼠各3只。A組大鼠第二次迎香穴埋線后取各組大鼠鼻茹膜，經RNA抽提、純化、質量檢測、cDNA合成后，以第二代功能分類Real-time PCR芯片一The Rat Inflammatory Response&Autoimmunity RTZ ProfilerTM PCR Array(含84個目標基因)研究穴位埋線治療后鼻茹膜免疫相關基因表達譜的改變情況，并以△OCt方法進行三組間兩兩比較的數據分析。
結論
1.穴位埋線及假埋線均有助于改善變應性鼻炎患者的癥狀(VAS評分)及相關的生活質量(RQLQ評分)。但穴位埋線組由于有埋入線體的持續刺激，該組受試者的癥狀(VAS評分)及相關的生活質量(RQLQ評分)改善較假埋線組更持久。穴位埋線也有助于改善受試者的鼻勤膜顏色、鼻分泌物、下鼻甲的腫脹情況，以及受試者治療前后血清特異性IgE的表達情況，但對參與免疫反應的其他細胞因子無改善作用。
2.穴位埋線可能通過改善感覺神經膚參與的鼻腔神經源性炎癥而減輕變應性鼻炎的狀況。但穴位埋線治療的AR大鼠模型組，經治療，癥狀雖較治療前緩解，但與空白組相比，組間感覺神經膚的表達差異仍有統計學意義，提示雖然沒有明顯癥狀，但是翁膜的炎癥狀態仍在持續。
3.利用功能性分類基因芯片技術有的放矢地對穴位埋線治療的變應性鼻炎動物的鼻豁膜的免疫相關基因表達譜進行差異表達基因的篩選是可行的。與全基因表達譜芯片的研究相比，該方法能夠更為快速、準確地篩選出目標基因，進而為穴位埋線治療變應性鼻炎的治療方法提供理論依據，并為進一步的研究指明方向。
關鍵詞
臨床療效評價，臨床安全性評價，動物實驗，鼻炎動物模型，大鼠動物模型
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