人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞系原代培養取材注意事項及要求 這些你都清楚嗎？
發布時間：
2021-12-09
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類風濕關節炎(rheumatoid arthritis,RA)是臨床常見的慢性炎性自身免疫性疾病,以多關節炎癥、滑膜增生和骨侵蝕為基本特征。吉妮歐提供 人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞系的原代培養技術及銷售代購相關服務，也可幫忙代做細胞建系。如有需要的同學請來電或在線預約！
滑膜炎癥伴大量血管翳形成是導致RA骨侵蝕、關節破壞的主要原因。疾病過程中,異常的血管新生是滑膜增生和血管翳形成的病理基礎。調節血管新生的因子有許多種,其中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是最重要的因子之一;其次,基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)也對血管翳的增生有重要作用。
原代細胞的取材
人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，是進行細胞培養的第一步，若取材不當，將會直接影響細胞的體外培養，現將取材的基本要求和注意事項敘述如下：
取材的基本要求
（1）取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養成功，取材時應盡量在4~6h內能制作成細胞，盡快入箱培養，若不能即時培養，應將組織浸泡于培養液內，于4℃存放。若組織塊較大，應在清除表面血塊、壞死組織、脂肪和結締組織后，切碎于培養液內4℃存放，但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應加入含10%二甲基亞砜的培養基，按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。
（2）取材應嚴格無菌 所取標本材料應在無菌條件下進行，為了確保無菌，對所取材料若疑有污染的可能，應將所取組織在含高濃度抗菌素（400單位/mL）甚至加入適量的兩性霉素B或10%達克寧液的培養液內于4℃下存放2小時以上，再用PBS洗2~3次，以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養液（內含400單位/mL抗菌素）的小瓶等便于攜帶的物品來取材，所取材料應避免接觸有毒有害的化學物質，如碘、汞等。
（3）取材和原代細胞制作時，要用鋒利的器械，如手術刀或剃須刀片切碎組織，盡可能減少對細胞的機械損傷。
（4）要仔細去除所取材料上的血液（血塊）、脂肪、壞死組織及結締組織，切碎組織時應避免組織干燥，可在含少量培養液的器皿中進行。
（5）取材應注意組織類型、分化程度、年齡等，一般來講，胚胎組織較成熟個體組織容易培養，分化低的較分化高的組織容易生長，腫瘤組織較正常組織容易培養。取材時應盡量選用易培養的組織進行培養。
（6）原代細胞取材時要同時留好組織學標本和電鏡標本。對組織的來源、部位、包括供體的一般情況要做詳細的記錄，以備以后查詢
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