金葡菌感染性心內(nèi)膜炎模型構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:
2022-03-11
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背景介紹(推薦閱讀:心血管疾病模型)
感染性心內(nèi)膜炎(IE)指由病原微生物直接侵襲心內(nèi)膜而引起的一種炎癥性疾病。瓣膜為最常感染部位,感染也可發(fā)生在室間隔缺損部位、腱索和心壁內(nèi)膜。
它的心內(nèi)效應(yīng)包括嚴(yán)重的瓣膜功能不全,可能導(dǎo)致頑固的充血性心力衰竭和心肌膿腫,感染性心內(nèi)膜炎還通過多種機(jī)制產(chǎn)生各種各樣的全身癥狀和癥狀,包括無菌和受感染的栓子和各種免疫現(xiàn)象。
建模原理
通過頸動(dòng)脈插管造成心臟瓣膜的機(jī)械創(chuàng)傷。
再尾靜脈注射金黃色葡萄球菌,侵入心內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞,從而造成心內(nèi)膜炎的發(fā)生。
建模方法
一、心臟插管手術(shù)
動(dòng)物麻醉后固定于手術(shù)臺(tái)上,碘伏消毒下巴到略低于胸骨的脖頸區(qū),用手術(shù)剪在大鼠頸部中心偏右側(cè)的地方開一小口,用鑷子分離皮下組織及肌肉,鈍性分離出右側(cè)頸總動(dòng)脈。
用手術(shù)縫合線將遠(yuǎn)心端結(jié)扎,在近心端用動(dòng)脈夾夾閉,并且準(zhǔn)備一根手術(shù)縫合線在近心端打一小結(jié)(未結(jié)扎),以備在后續(xù)過程中快速結(jié)扎減少大鼠出血量。
用25G針頭在右側(cè)頸總動(dòng)脈扎一個(gè)斜口,插入PE-10導(dǎo)管,去掉動(dòng)脈夾,將導(dǎo)管緩慢推入,直到遇到阻力。
遇到阻力后,稍稍收回導(dǎo)管即可,導(dǎo)管插入距離大約為4-4.5cm。
對(duì)近心端進(jìn)行結(jié)扎和導(dǎo)管末端封口處理(閉合及固定)。
清理手術(shù)過程中的血液之后,可看到導(dǎo)管隨心臟有較強(qiáng)的搏動(dòng)感,表明導(dǎo)管己進(jìn)入左心室腔內(nèi)。最后縫合手術(shù)切口,消毒后放回籠中飼養(yǎng)。
二、細(xì)菌感染
手術(shù)24h后進(jìn)行細(xì)菌感染,金黃色葡萄球菌菌株在腦心浸液肉湯培養(yǎng)基中,37攝氏度下培養(yǎng)24h。
然后離心肉湯(8 °C下8,000g離心8min)。回收細(xì)菌沉淀物,用無菌生理鹽水稀釋到所需濃度。尾靜脈注射菌液 5ml (3 × 105 cfu)。
模型成功評(píng)判
1、導(dǎo)管插入心臟后是否可觀察到導(dǎo)管規(guī)律性搏動(dòng)。
2、主動(dòng)脈瓣應(yīng)有贅生物形成。
3、血清菌落數(shù)量。
心臟贅生物形成情況
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