溫針灸對兔膝骨關節(jié)炎模型表達的影響 明確溫針灸抑制軟骨細胞過度凋亡的途徑
發(fā)布時間：
2022-06-30
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摘要
膝骨關節(jié)炎是由各種原因?qū)е萝浌羌毎^度凋亡使正常軟骨細胞數(shù)量減少、關節(jié)軟骨自我修復受損，造成關節(jié)軟骨損傷的一種退行性骨關節(jié)病。（推薦閱讀：膠原誘導關節(jié)炎(CIA)嚙齒動物模型、類風濕性關節(jié)炎(RA)模型、膠原誘導關節(jié)炎（CIA）嚙齒動物模型、骨關節(jié)炎模型）
在正常穩(wěn)態(tài)下，軟骨細胞的增殖和凋亡處于平衡狀態(tài)，起到維持軟骨結(jié)構(gòu)與功能穩(wěn)定的作用。當軟骨細胞過度凋亡時，內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)被打破，軟骨損傷加劇，導致膝骨關節(jié)炎的加速發(fā)展。
研究表明溫針灸治療膝骨關節(jié)炎的療效確切，可改善軟骨細胞凋亡狀態(tài)4，但其作用途徑不明確。P13K/Akt 信號通路對調(diào)控細胞凋亡發(fā)揮著重要作用5，該信號通路的激活及其下游因子Bcl-2、Bax表達的變化是影響軟骨細胞凋亡的關鍵問。
因此，此次實驗基于PI3K/Akt 信號通路，觀察溫針灸對兔膝骨關節(jié)炎模型 PI3K、Akt、Bcl-2、Bax 的表達的影響，明確溫針灸抑制軟骨細胞過度凋亡的途徑。
背景
溫針灸臨床治療膝骨關節(jié)炎療效顯著，但基礎治療機制尚未明確。
目的
觀察溫針灸對兔膝骨關節(jié)炎動物模型關節(jié)軟骨中PI3K/Akt信號通路及其下游因子Bcl-2、Bax表達的影響。
方法
取6月齡新西蘭兔40只，采用隨機數(shù)字表法分為正常組、模型組、藥物組、溫針灸組，每組10只。模型組、藥物組、溫針灸組兔右后肢膝關節(jié)伸直位以石膏管型固定4周，制備膝骨關節(jié)炎模型。造模成功后，模型組每日置于兔架上固定15 min，藥物組每天行硫酸氨基葡萄糖灌胃治療（77mg/kg，1次/d），溫針灸組每天行溫針灸治療（15 min/次，1次/d）。連續(xù)治療28 d后，利用蘇木精-伊紅染色觀察軟骨損傷程度，Tunel法檢測軟骨細胞凋亡，RT-PCR法檢測軟骨組織中PI3K、Akt、Bcl-2、Bax的mRNA表達，Western blot法檢測軟骨組織中PI3K、Akt、Bcl-2、Bax的蛋白表達。
結(jié)果
①蘇木精-伊紅染色顯示，模型組軟骨細胞數(shù)量減少，細胞排列無序，層次紊亂，軟骨面被破壞，Mankin評分顯著升高;藥物組與溫針灸組軟骨細胞數(shù)量明顯增多，基質(zhì)著色深，Mankin評分降低
②與正常組相比，模型組軟骨細胞凋亡率增高（P<0.05）; 與模型組相比，藥物組、溫針灸組軟骨細胞凋亡率降低（P< 0.05）
③RT-PCR與Western blot檢測顯示，與正常組相比，模型組PI3K、Akt、Bcl-2的mRNA與蛋白表達降低（P<0.05），Bax的mRNA與蛋白表達升高（P<0.05）∶與模型組相比，溫針灸組與藥物組PI3K、Akt、Bd-2的mRNA與蛋白表達升高（P<0.05），Bax的mRNA與蛋白降低（P<0.05）
④結(jié)果表明溫針灸可通過調(diào)控PI3K/Akt信號通路引起下游因子Bc-2表達升高、Bax表達降低，進而抑制軟骨細胞過度凋亡，達到保護關節(jié)軟骨的作用。
關鍵詞∶膝骨關節(jié)炎;溫針灸;軟骨細胞凋亡;PI3K/Akt信號通路;下游因子
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