通過慢病毒介導構建腫瘤抑制基因p53沉默人肺腺癌A549細胞模型，檢測p53沉默后對人肺腺癌A549細胞自噬反應的影響

發(fā)布時間：

2022-07-07

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專業(yè)提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB細胞庫源細胞、動物實驗、CRO服務、SCI潤色)

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檢測p53沉默人肺腺癌A549細胞模型構建成功；Western blotting結果顯示，p53沉默下調 p62和上調 LC3，促進細胞自噬。結論 ?成功構建慢病毒介導的腫瘤抑制基因p53沉默人肺腺癌A549細胞模型，該細胞模型能夠促進自噬的發(fā)生發(fā)展，可能為臨床治療肺癌疾病提供一種新的思路

　　摘要
　　近年來研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，p53作為一個腫瘤抑制基因，對于維護基因組和細胞穩(wěn)態(tài)起著重要的作用。自噬作為一種細胞自我保護機制，能夠在營養(yǎng)缺陷狀態(tài)下，維持細胞的存活。自噬性細胞死亡與腫瘤發(fā)生發(fā)展也有著重要的聯(lián)系團。研究發(fā)現(xiàn)，定位于細胞質的 p53通過轉錄非依賴方式抑制自噬，而定位于細胞核的 p53通過反式激活靶基因增強自噬。因此p53對自噬是一把雙刃劍。但是迄今為止，還未明確 p53在人肺腺癌 A549 細胞中與自噬的關系，本研究通過慢病毒技術構建 p53沉默的人肺腺癌 A549細胞模型并且初步探索其與自噬的關系，從而為臨床治療肺癌提供新的思路。
　　目的
　　通過慢病毒介導構建腫瘤抑制基因p53沉默人肺腺癌A549細胞模型，檢測p53沉默后對人肺腺癌A549細胞自噬反應的影響。
　　方法
　　利用 pCDH-MSCV-MCS-EF1-Pund 慢病毒載體構建重組質粒，將重組質粒和空載質粒轉染 293T細胞，收集病毒液后，感染 A549細胞，構建沉默細胞模型。將空載質粒組和重組質粒組分別設置為對照組和實驗組。利用Western blotting技術檢測p53沉默效率和自噬相關指標p62和LC3。

　　結果
　　檢測p53沉默人肺腺癌A549細胞模型構建成功；Western blotting結果顯示，p53沉默下調 p62和上調 LC3，促進細胞自噬。結論成功構建慢病毒介導的腫瘤抑制基因p53沉默人肺腺癌A549細胞模型，該細胞模型能夠促進自噬的發(fā)生發(fā)展，可能為臨床治療肺癌疾病提供一種新的思路。
　　關鍵詞
　　人肺腺癌A549細胞,細胞模型,p53,肺腺癌, 自噬