吉妮歐提供ELISPOT分析檢測服務助力疫苗研發(fā)
發(fā)布時間：
2024-12-23
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ELIspot（酶聯(lián)免疫斑點檢測）是一種結合細胞培養(yǎng)技術與酶聯(lián)免疫吸附技術（ELISA）的實驗方法，用于檢測單個細胞分泌的細胞因子。該技術使用涂有特定抗體的膜來捕獲細胞因子，通過酶聯(lián)斑點顯色的方式展示結果。
ELISpot 實驗原理圖 來源于Janetzki S, Price L, Schroeder H, Britten CM, Welters MJ, Hoos A. Guidelines for the automated evaluation of Elispot assays. Nat Protoc. 2015 Jul;10(7):1098-115. doi: 10.1038/nprot.2015.068. Epub 2015 Jun 25. PMID: 26110715.
ELIspot 實驗大致流程
1. 膜準備
使用PVDF膜為底的96孔板，包被特定的單克隆抗體。
2. 細胞培養(yǎng)
• 向孔內添加待檢測的細胞和抗原刺激物進行培養(yǎng)。
• 在刺激下，細胞會分泌相應的細胞因子，這些因子被膜上的抗體所捕獲。
3. 洗滌與檢測
• 洗去細胞后，被捕獲的細胞因子與生物素標記的第二抗體結合。
• 使用酶標記的親和素與生物素結合，進行化學酶聯(lián)顯色，形成圓形斑點。
4. 數(shù)據(jù)分析
統(tǒng)計膜上斑點的數(shù)量，并將其除以初始細胞的總數(shù)，以計算陽性細胞的百分比。
ELISpot實驗結果圖與對應統(tǒng)計表格
ELIspot 技術特點
高靈敏度：在一百萬個陰性細胞中，可以檢測到一個陽性細胞，靈敏度比傳統(tǒng)ELISA高2-3個數(shù)量級。
單細胞水平：檢測活細胞分泌的細胞因子，而非細胞群體的平均分泌，有效評估活細胞功能。
操作簡便與經(jīng)濟：無需復雜的細胞體外擴增過程，無同位素使用，也不需要大型專用設備，能夠處理大量樣品，提高檢測效率。
ELIspot技術廣泛應用于：
• 感染性和腫瘤疫苗的臨床藥效學評估
• 免疫原性檢測：影響CAR-T細胞擴增和存續(xù)的重要因素。
• 藥物篩選：評估基因治療產(chǎn)品安全性和有效性的重要指標。
通過ELIspot技術，研究人員可以獲得更準確、有效的細胞因子分泌信息，為疫苗開發(fā)和免疫療法研究提供了重要工具。
案 例 展 示
乙肝mRNA疫苗動物模型-Elispot-T細胞檢測
乙肝mRNA疫苗動物模型-Elispot-HBsAb
吉妮歐生物擁有豐富的細胞資源和動物模型，可提供多種體外細胞檢測服務，我們在這領域積累了豐富經(jīng)驗和大量的實驗數(shù)據(jù)。
為助力疫苗研發(fā)，吉妮歐生物可提供ELISpot分析檢測服務，根據(jù)客戶的不同需求，設計合適的方案，提供有效的方法學驗證，出具個性化的分析結果報告，不僅可以為客戶提供一站式ELISpot分析檢測服務，也可為有需求的客戶提供讀板服務。
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