何時需做細胞系鑒定？需要“細胞身份證明”-細胞STR鑒定
發布時間：
2022-01-04
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在過去的幾十年間，細胞生物學領域的文章一直在發表，科研成果一直在公布，但是，當中哺乳動物細胞被錯誤鑒定、存在交叉污染的情況也同時存在著。
首先，想問大家一個問題：認錯了細胞系會造成什么后果呢?
稍微想一下，就知道后果很嚴重——
1、浪費時間和科研經費;
2、實驗結果不可重復、科研結果不可靠;
3、會被學術期刊拒收或撤稿。
據統計，目前有超過30%的細胞系被錯誤辨識或受到交叉感染。
2010年《國際癌癥雜志》(IJC)統計出一列表，在346篇文章中，有103篇存在細胞被Hela細胞污染的情況。
最可怕的錯用是在瑞典某大學的一個研究組里，該研究組從1988年起就錯誤的使用了Hela，以為是lnt-407細胞系，并因此在從1988到2011年里發表了41篇論文，全部是錯的。這些文章發在Oncogen,JBC，Carcinogenesis,PLoS One, J Cell Physiol, Cancer Res, Br J Cancer, Biochem J, Exp Cell Res等眾多較好的雜志上。
圖：Hela細胞
除了著名的Hela細胞外，在2001年，科學家在一篇論文里報道了一株新建立的大鼠視網膜神經節的細胞系，命名為RGC-5。在隨后的十幾年時間里，至少230篇論文的研究與假設是建立在這株細胞系上。結果在2009年，序列測定結果表明，RGC-5是一株小鼠(mouse)細胞。
2017年，武漢大學病毒學國家重點實驗室發表了一篇文章，主題便是“278株常見人源腫瘤細胞系的交叉污染及錯誤鑒定”，該實驗室采用STR分型方法進行細胞系遺傳背景鑒定，結果得到了一個可怕的結果。
作者分別從國內28個研究機構搜集了278株常見人源腫瘤細胞系，其中國內建立的細胞系71株，國外建立的細胞系207株。
經STR鑒定后發現，來自于22個研究機構的128株細胞存在交叉污染/錯誤鑒定的情況，錯誤率高達46%。其中國內建立的細胞系占52株，
這表明了什么，國內建立的細胞系交叉污染/錯誤鑒定率竟然高達73.2%，并且67.3%(35/52)國內交叉污染/錯誤鑒定的細胞系結果被證實是Hela細胞或被Hela細胞部分污染的!
據統計，128株錯誤細胞系中，其中交叉污染細胞系占84.8%(108/128)，其余為錯誤鑒定細胞系。從國內/國外來源細胞的情況統計結果看，Hela細胞的絕對“攪屎棍”地位不容撼動!
所以，你需要“細胞身份證明”——細胞STR鑒定
近年來，大量研究表明STR 基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的最有效和準確的方法之一，STR 基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦，美國的ATCC細胞庫、德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR 分型提供了各細胞株的數據供對比。
STR基因位點由長度為3~7個堿基對的短串連重復序列組成，這些重復序列廣泛存在于人類基因組中，可作為高度多態性標記，被稱為細胞的DNA指紋，其可通過PCR(聚合酶鏈式反應)來檢測，STR基因座位上的等位基因可通過擴增區域內重復序列的拷貝數的不同來區分，在毛細管電泳分離之后可通過熒光檢測技術來識別，隨后通過一定的計算方法，即可根據所得的STR分型結果與專業的細胞STR數據庫比對從而推算出樣品所屬的細胞系或可能交叉污染的細胞系名稱。
何時需做細胞系鑒定？
1. 發表文章或申請課題經費前;
2. 使用細胞進行臨床治療(試驗)前;
3. 準備凍存保種或已凍存多年的細胞;
4. 一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時;
5. 新得到的細胞或實驗室培養5代以上的細胞;
6. 細胞系表現不穩定或結果與預期差別較大;
如何減少細胞系交叉污染？
1. 從信譽良好的組織或機構獲得細胞系
2. 良好的文檔編制方法
3. 訓練有素的技術操作員
4. 每種細胞系單獨使用培養基
5. 溶液或試劑分裝使用
6. 常規性地注意細胞系身份以及其特性是否發生污染
7. 早期做好充足的凍存儲備
8. 細胞培養代數不要太高
有了細胞STR鑒定，你的細胞也是有“身份”的細胞啦！而且科研成果更可靠，也不用擔心發表科研文章時的細胞鑒定問題了，有沒有感覺很強大、很安心呢!
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