臨床前和臨床研究談肝癌免疫治療新進(jìn)展

發(fā)布時(shí)間：

2022-04-22

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作者：

吉妮歐

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如何把肝臟腫瘤從"冷"向"熱"，或者說(shuō)有不錯(cuò)反應(yīng)率的腫瘤轉(zhuǎn)變，這需要深度的動(dòng)物模型機(jī)制研究和大樣本的人體試驗(yàn)數(shù)據(jù)

　　肝細(xì)胞癌（HCC）是世界范圍內(nèi)致死率最高的惡性腫瘤之一，目前尚無(wú)針對(duì)發(fā)病機(jī)制為基礎(chǔ)的有效治療【1】。HCC對(duì)化療不敏感，且手術(shù)切除、局部射頻消融等治療效果有限【。雖然，目前已有不少治療肝癌的靶向藥物出現(xiàn)，譬如索拉非尼（Sorafenib）、侖伐替尼（lenvatinib），但治療效果非常有限，也僅延長(zhǎng)了患者幾個(gè)月的生存期【2.1。因此，隨著免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICIs）在晚期黑色素瘤或肺癌上取得不錯(cuò)效果后，ICIs 在未進(jìn)行臨床前試驗(yàn)的情況下，隨即進(jìn)入臨床試驗(yàn)治療晚期肝細(xì)胞癌。結(jié)果顯示，藥物的毒性和安全性可控，但治療效果相對(duì)有限，治療反應(yīng)率不高，因此，一個(gè)亟待解決的問(wèn)題出現(xiàn)了，那就是如何把肝臟腫瘤從"冷"向"熱"，或者說(shuō)有不錯(cuò)反應(yīng)率的腫瘤轉(zhuǎn)變，這需要深度的動(dòng)物模型機(jī)制臨床前研究和大樣本的人體試驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　近年來(lái)，隨著免疫抑制共受體在 T淋巴細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，通過(guò)增強(qiáng)免疫抑制腫瘤才取得真正的突破。比如，在預(yù)先皮下注射了結(jié)腸腫瘤 51BLiml0細(xì)胞或 SalN纖維肉瘤細(xì)胞的小鼠腹腔內(nèi)注射抗CTLA-4抗體，而非抗CD28抗體，抑制了小鼠體內(nèi)的腫瘤生長(zhǎng)【1。細(xì)胞毒性 T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4（CTLA-4），又稱(chēng)為 CD152，通過(guò)與CD28 的配體 CD80（B7-1）和 CD86 （B7-2）結(jié)合，負(fù)向調(diào)節(jié)T細(xì)胞活性【0。程序性細(xì)胞死亡蛋白-1 （PD-1）通過(guò)與其特異性配體 PD-L1（B7-Hl，CD274）和 PD-L2 （B7-DC，CD273）相互作用，抑制 T細(xì)胞的活性和增殖【】。Honjo等在小鼠體內(nèi)證實(shí)，P815 肥大細(xì)胞瘤表達(dá)程序性細(xì)胞死亡蛋白-1（PD-1）后能顯著增強(qiáng)細(xì)胞的成瘤性和侵襲性【【3。這些開(kāi)創(chuàng)性的研究表明，通過(guò)阻斷免疫抑制信號(hào)可以抑制腫瘤。很快腫瘤免疫療法進(jìn)入臨床試驗(yàn)。一家創(chuàng)新型小公司 Medarex 研制了人源化的抗 PD-1抗體（nivolumab）。2006 年，被美國(guó)FDA批準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗(yàn)，2008年日本也開(kāi)展相關(guān)臨床試驗(yàn)。到 2012年，人源化的抗 PD-1抗體治療非小細(xì)胞型肺癌、黑色素瘤、腎細(xì)胞癌的1期臨床試驗(yàn)結(jié)果被相繼報(bào)道【。當(dāng)這種腫瘤免疫療法成功地挽救了一些晚期轉(zhuǎn)移性黑色素瘤和腎癌的患者時(shí)，全世界都為之興奮。2013年 Science 雜志將腫瘤免疫治療評(píng)選為當(dāng)年的十大科學(xué)突破。本文將重點(diǎn)回顧闡述動(dòng)物模型結(jié)合臨床前研究以及臨床試驗(yàn)研究在促進(jìn) HC免疫治療中的價(jià)值。
　　一、ICIs 在肝癌患者中的臨床試驗(yàn)
　　2013年，Sangro 等報(bào)道了CTLA-4抗體（tremelimumab）治療 HCC的無(wú)對(duì)照、開(kāi)放標(biāo)簽、多中心的ⅡI期臨床試驗(yàn)【7。該臨床試驗(yàn)在 20 例由丙型肝炎引起肝硬化最終發(fā)展成為 HCC患者身上進(jìn)行，結(jié)果顯示CTLA-4抗體有抗腫瘤和抗病毒效應(yīng)，且藥物的不良反應(yīng)可控。2017年，El-Khoveiry【報(bào)道了其與多名全球合作者共同開(kāi)展了一項(xiàng)抗 PD1抗體（nivolumab）治療晚期HCC（CheckMateO40）的開(kāi)放標(biāo)簽，非比較性的1/11期臨床試驗(yàn)（NCTO1658878）。該臨床研究共招募 262例多病因?qū)е碌耐砥?HCC患者。結(jié)果表明，無(wú)論是否接受過(guò)索拉非尼治療，niyplumab都有不錯(cuò)反應(yīng)率和總體生存時(shí)間，且藥物安全可控.
　　一項(xiàng)非隨機(jī)，開(kāi)放標(biāo)簽的II期臨床試驗(yàn)（Keynote-224）評(píng)估了抗 PD-1藥物 pembrolizumab 治療 104 例接受過(guò)索拉非尼治療的晚期 HCC 患者的安全性和有效性，結(jié) 果表明，Pembrolizumab也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的安全性和毒性的事件【】。對(duì)這些 HBV 或 HCV感染史且索拉非尼治療后發(fā)生病情進(jìn)展的HCC患者的客觀(guān)反應(yīng)率為17%。最常見(jiàn)的免疫相關(guān)不良反應(yīng)有甲狀腺功能減退，腎上腺功能不足，以及甲狀腺炎，這些不良反應(yīng)與Pembrolizumab治療其他腫瘤出現(xiàn)的一樣。PD-L1在腫瘤和免疫細(xì)胞中的聯(lián)合表達(dá)可預(yù)測(cè) pembrolizumab 的反應(yīng)性。20%（6/30）低表達(dá)的 PD-Ll 的患者，也對(duì)抗 PD-1治療有效。全球，仍有很多1CIs治療HCC的臨床試驗(yàn)正在開(kāi)展中，每年都
　　有新的臨床試驗(yàn)結(jié)果出來(lái)。其中包括兩個(gè)二線(xiàn)治療晚期肝癌的III期臨床試驗(yàn)（KEYNOTE-240和 KEYNOTE-394）。不少臨床試驗(yàn)旨在評(píng)估抗CTLA-4和PD-1或PD-L1 聯(lián)合其他藥物或者物理治療的聯(lián)合治療策略t19.
　　二、肝臟中的特殊免疫微環(huán)境
　　最初的臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，免疫治療在 HCC中展現(xiàn)出較低的反應(yīng)率和有限的治療益處【*.n，因此，在探討可能影響臨床結(jié)果的分子、細(xì)胞因素時(shí)，不能忽視肝臟免疫耐受。肝臟在免疫調(diào)節(jié)中起著重要的作用。從腸道，除了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，肝臟還獲得能被肝臟獨(dú)特的"肝竇"結(jié)構(gòu)有效識(shí)別、加工或清除的物質(zhì)，包括微生物、微生物相關(guān)分子模式（MAMPs）和損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）。相應(yīng)地，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（LSECs）表達(dá)一系列模式識(shí)別受體（PRRs），負(fù)責(zé)清除血液中的可溶性大分子和膠狀廢物【m。另外，肝臟里常駐著數(shù)量最多的庫(kù)普弗細(xì)胞，它們也表達(dá)多種類(lèi)型的 PRRs，通過(guò)吞噬作用識(shí)別和清除不溶性的廢物。肝臟的另外一個(gè)顯著特征是富含 NK∶YKT 和 TCRyaT 細(xì)胞，以及相對(duì)外周血 CD8+/CD4+T 細(xì)胞比例更高。
　　肝臟最重要的免疫特性之一是誘導(dǎo) T 細(xì)胞耐受導(dǎo)致肝臟免疫耐受，從而防止對(duì)從腸子吸收的抗原的過(guò)激免疫反應(yīng)。雖然。潛在的機(jī)制仍有待網(wǎng)明，肝臟的免疫神制環(huán)境顯然是由原價(jià)T細(xì)胞，LESCs、樹(shù)實(shí)狀細(xì)胞。枯否氏細(xì)胞和肝細(xì)胞通過(guò)促教和抑教細(xì)的因子的相可.協(xié)調(diào)練法的L1。肝整 T細(xì)均的付安是
　　在缺少共朝激因子和CD4+細(xì)的敬量少。或由枯否氏細(xì)炮分泌
　　的IL-10 刺激導(dǎo)致的 Tre細(xì)胞擴(kuò)增的環(huán)境下被持續(xù)的抗原選呈而誘導(dǎo)產(chǎn)生【i2，盡管這些免疫抑制對(duì)準(zhǔn)持肝航內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要，但這也可能造成 HCC的免疫選逸，
　　三，原發(fā)性肝癌的免疫概況。
　　肝臟源性腫瘤通常在慢性壞死性教癥的情況下發(fā)生，其特征是細(xì)胞死亡·代償性再生，肝犁狀細(xì)胞（HSCs）過(guò)度活化和纖途化.以及侵洞的教癥細(xì)胞和派巴細(xì)胞的功能改變，在HCC 患者中檢測(cè)到與全身炎癥反應(yīng)相關(guān)的自發(fā)性腫瘤消退，表明肝癌至少有一些基礎(chǔ)免疫原性【.另外，據(jù)估計(jì)，超過(guò)一半的HCC 患者對(duì)腫瘤相關(guān)抗原 NY-ESO0-1自發(fā)地產(chǎn)生免疫反應(yīng)。經(jīng)皮酒精注射療法針和射須消原（radiofrequency 動(dòng)Lation，RFA）能透發(fā)T細(xì)胸對(duì)腫瘤阻級(jí)的侵洞04】.
　　在人的肝癌樣本中。耗竭性CD8+ T細(xì)胞和 Tre細(xì)胞增多、且存在克隆擴(kuò)增En，還檢測(cè)到了一系列已知的和特征不明顯的耗雞相關(guān)基因。模蛋白Layiin在活化的CD8 T細(xì)胞和Tre 細(xì)胞中上調(diào)，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其可以抑制原始 CTD8+ T細(xì)胞產(chǎn)生干擾素 y，該現(xiàn)象與不良預(yù)后相關(guān)。對(duì)泰國(guó)的 HCC/KC 患者進(jìn)行大散圍基因表達(dá)譜檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在癌和癌旁組織之間發(fā)現(xiàn)免疫神制基因，包括PD-L1.FD-1.CTLA-4.TIM3.防H3 和LA(Gti4.
　　在小佩模型中，由β-連環(huán)蛋白CTNNB1 突變導(dǎo)致的肝臟腫瘤對(duì)抗 PD-1治療反應(yīng)率低【n】。可能的機(jī)制是，Wnd/βcatenin通路的異常激活導(dǎo)致趨化因子，特別是CCF5 的表達(dá)受損，引起募集樹(shù)實(shí)狀細(xì)胞和 CD8+T細(xì)胞進(jìn)入肝臟受損。這些受損/缺陷引發(fā) HCC的免疫速逸及對(duì) PD-1抗體的反應(yīng)應(yīng)答低下，這與在人類(lèi)HCC中觀(guān)察到 3-連環(huán)蛋自活化和抗 PD-1治療抵抗的現(xiàn)象相一致.
　　因、肝教腫瘤由冷"變"雞"
　　盡管Kis 在許多癌癥中取得了顯著的效果，但發(fā)現(xiàn)在相當(dāng)一部分癌癥患者中 Cls 治療是沒(méi)有效果或僅部分有效，而且出現(xiàn)新的問(wèn)題，即部分患者對(duì)藥物產(chǎn)生耐受最初有效果的患者出現(xiàn)腫瘤的復(fù)發(fā)，因此。如何提高免疫治療的有效性.即把-冷"腫瘤變?yōu)橐粨?dān)"腫瘤使之對(duì)藥物有反應(yīng)，成為一個(gè)急迫的問(wèn)題，
　　（注∶順據(jù)腫中瘤細(xì)的成國(guó)的如痤細(xì)均的您少。將腫瘤分為擔(dān)中瘤和冷腫瘤.
　　一般情況下，HCC對(duì) KCls 反應(yīng)弱。在 HCC小鼠模型中，單獨(dú)注射抗 PD-L1抗體。沒(méi)有顯示出任何顯著的腫瘤抑制作用tn】。另一項(xiàng)在轉(zhuǎn)基因小佩系的研究中也獲得了類(lèi)似的結(jié)果Cn，因此，如何將冷肝細(xì)胞癌轉(zhuǎn)變成熱肝細(xì)胞癌是非常必要，LcgD1 意外地在小限中發(fā)現(xiàn)了聚肌苷酸-聚胞苷酸（plyC）能夠有效地神制腫瘤，pdyX是一種合成的雙鈷RNA.能有效地激活模式識(shí)別受體 TLR3，RIG-1/MDA5 和蛋白激酶PKR，通過(guò)刺激多種天然免疫細(xì)胞群，包括肝臟中的NK 細(xì)胸、M巨噬細(xì)胞和樹(shù)實(shí)狀細(xì)胞。協(xié)同微消這些天然抗腫物功能導(dǎo)殖在停前階段造除"高位"轉(zhuǎn)化細(xì)胸.從面防止肝疼的峰冊(cè)己。
　　與pokKC或 FD-l1油b單獨(dú)使用相比，聯(lián)合使用 palyKC和FD-ll動(dòng)b 對(duì)肝癌具有明顯的神制作用，甚至對(duì)小飄的晚期腫瘤也有顯著的抑制作用【12。聯(lián)合治療后，發(fā)現(xiàn)大量的 CD8+T 細(xì)胞被幕集并浸損到肝臟腫瘤，值相一提的是;polyC逐導(dǎo) PT L1 在 LSECs中表達(dá)與與腫瘤發(fā)生無(wú)關(guān)，因?yàn)椴徽撛诮】蹈闻K還是荷瘤的肝膠中都能檢測(cè)上述現(xiàn)象，因此。這種方法與肝癌腫瘤導(dǎo)致的各種腫瘤免疫速逸機(jī)制無(wú)關(guān)，總之，這些小佩的臨床前數(shù)據(jù)證明了用KC1s治療肝臟腫瘤是一種可行策略。
　　四、展望
　　毫無(wú)疑問(wèn)，靶向 1Cls的免疫治療已經(jīng)改變了腫瘤治療策略，在治療不可切除的 HCC（IMbrave 150）時(shí)，aezalizumzb單抗《抗 PD-L1）和 bevacirnm油單抗（抗 VEX活F）的聯(lián)合治療比soracnib需拉非尼有更好的總生存率和無(wú)進(jìn)展生存率Ez0】，作為第一個(gè)在提高生存率上超討需拉非尼的肝癌治療菌略.這項(xiàng)研究為聯(lián)合免疫治療提供了巨大的希望。
　　對(duì) HCC免疫治療進(jìn)行有效設(shè)計(jì)時(shí)，必須解決兩個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題;肝膠腫瘤細(xì)胞免疫原性的強(qiáng)度和促進(jìn)肝癌進(jìn)展的免疫選遵的具體機(jī)制。還有兩個(gè)問(wèn)題值得關(guān)注·根據(jù)可靠的生物標(biāo)志物論選出患者可以提高治療的應(yīng)答率。另一個(gè)事有意思的問(wèn)題是使用額外的藥物將低應(yīng)答或無(wú)應(yīng)答的患者轉(zhuǎn)化為1Cl應(yīng)答者。總之。通過(guò)將臨床前研究與臨床研究相結(jié)合，期有助于發(fā)現(xiàn)新的免疫神制分子和信號(hào)通路。為肝癌的靶向治療提供新的靶點(diǎn)。