【摘要】胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤（pNEN）是相對(duì)罕見(jiàn)的胰島細(xì)胞起源的腫瘤，在組織病理學(xué)、生物學(xué)行為、臨床表現(xiàn)等方面異質(zhì)性顯著。近年來(lái)，研究的推廣和認(rèn)識(shí)的加深推動(dòng)著國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家共識(shí)、臨床指南的快速更新。然而，pNEN發(fā)病率低、異質(zhì)性高的特點(diǎn)使其臨床前研究工作在腫瘤學(xué)領(lǐng)域處于相對(duì)落后地位。多中心、跨區(qū)域乃至國(guó)際化合作既是保證研究罕見(jiàn)病樣本量的重要模式，也為對(duì)比分析不同遺傳背景pNEN的特征搭建平臺(tái)。隨著研究數(shù)據(jù)的快速積累，逐級(jí)細(xì)化研究亞型將有助于系統(tǒng)、全面地認(rèn)識(shí)pNEN的群體異質(zhì)性。此外，利用單細(xì)胞測(cè)序等前沿技術(shù)手段從細(xì)胞水平闡述 pNEN的個(gè)體異質(zhì)性可能會(huì)帶來(lái)突破性的進(jìn)展。
　　【關(guān)鍵詞】胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤;分子特征;疾病模型;臨床前研究
　　胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤（pancreatic neuroendocrine neo-plasm，pNEN）是起源于胰島內(nèi)分泌細(xì)胞的上皮性腫瘤，相對(duì)罕見(jiàn)占胰腺腫瘤的比例<5%。PNEN分布具有明顯地區(qū)差異∶在美國(guó)、英國(guó)等歐美地區(qū)，pNEN較小腸和直腸內(nèi)分泌腫瘤少見(jiàn);而在中國(guó)、印度等亞洲地區(qū)，pNEN是最常見(jiàn)的消化系統(tǒng)內(nèi)分泌腫瘤"】。隨著臨床醫(yī)生對(duì)該疾病認(rèn)識(shí)的加深以及影像學(xué)等診斷技術(shù)的進(jìn)步，pNEN發(fā)病率在全球范圍內(nèi)均明顯上升，這可能主要?dú)w因于體積小、無(wú)癥狀腫瘤的檢出率增加。
　　高度異質(zhì)性是 pNEN最鮮明的特征∶根據(jù)是否來(lái)源于家族性綜合征，分為散發(fā)性和遺傳相關(guān)性;根據(jù)腫瘤細(xì)胞分化，分為胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤（pancreatic neuroendocrine tu-mor，pNET）和神經(jīng)內(nèi)分泌癌（pancreatic neuroendocrine car-cinoma，pNEC），前者則依據(jù)增殖指數(shù)再分為G1、G2、G3級(jí);根據(jù)是否出現(xiàn)激素過(guò)量分泌導(dǎo)致的相關(guān)臨床表現(xiàn)，分為無(wú)功能性和功能性。此外，pNEN在生物學(xué)行為、治療應(yīng)答、預(yù)后等諸多方面均差異顯著。近年來(lái)，pNEN 領(lǐng)域關(guān)注度較高、研究成果頗豐，推動(dòng)著國(guó)內(nèi)外指南、共識(shí)的快速更新。
　　1. 高通量檢測(cè)技術(shù)在 pNEN 中的研究進(jìn)展
　　以微陣列芯片、二代測(cè)序等技術(shù)為代表的高通量檢測(cè)不僅是研究pNEN分子特征的重要平臺(tái)，也為pNEN診斷與鑒別診斷、治療選擇與療效評(píng)估、隨訪(fǎng)監(jiān)測(cè)等臨床實(shí)踐提供了具有廣闊前景的輔助手段。
　　1.1 基因組
　　1.1.1 基因變異

　　多發(fā)性?xún)?nèi)分泌腫瘤綜合征1型（muliple endocrine neoplasla type 1MENI）等家族性綜合征的發(fā)現(xiàn)是遺傳變異導(dǎo)致pNEN發(fā)生的重要例證。利用測(cè)序技術(shù)分析MENI等致病基因的胚系變異對(duì)以pNEN為首發(fā)癥狀的病人具有重要篩選價(jià)值。2011年，Jiao 等3l對(duì)散發(fā)性pNET 進(jìn)行全外顯子測(cè)序（whole-exome seoenceingwES）分析聯(lián)合Samge測(cè)序驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)MEN/ 基因同樣具有高頻的體謂胞變異（44%）且里程碑式地揭示了43%的腫瘤存在染色質(zhì)重塑復(fù)合物相關(guān)基因DLXXM7RX的互斥突變。此外，14%的pNET被檢測(cè)出mTOR通路相關(guān)基因突變從遺傳變異角度部分解釋了既往報(bào)道中該通路分子大量異常表達(dá)的原因。Scara等*對(duì)102 例散發(fā)性pNEN進(jìn)行全基因組測(cè)序《whd一gamane yguensm。WGS）不僅驗(yàn)證了上述研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)了D歷PDC5失活突變，EWSR!基因融合等新的miTOR 通路活化機(jī)制。日前對(duì)高頻突變的ATRX，QX，MEV八l-D-M）基因所遍礙的蛋自進(jìn)行免疫潤(rùn)化染色可用于銷(xiāo)助整別形態(tài)學(xué)區(qū)分國(guó)難的pNET和pNEC后者主要存在TP53和RB!基因突變。此外有研究顯示攜帶上述A-D-M突變的pNET病人術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移時(shí)間較野生型病人顯著縮短提示其作為預(yù)后指標(biāo)的潛在生物學(xué)價(jià)值。mIOR拇制劑依維莫司是進(jìn)展期ET的主要配向藥物RADIANT-3 Ⅱ期臨床試驗(yàn)是示依維英司較安慰劑明顯廷長(zhǎng)pNET病人的無(wú)進(jìn)展生存期但對(duì)總生存期影響并不顯著表明獲得性耐藥可能削制了其臨床療效（~l。鑒于pNET中存在較高頓的mTOR通路抑制基因變異以突變?yōu)閷?dǎo)向的配向道療可能有利于更精準(zhǔn)地篩選病人使治療效益最大化9。
　　功能性腫瘤占 pNEN的10%-15%其中論大多數(shù)是胰島素瘤。C。等4檢測(cè)39例膜島素瘤發(fā)現(xiàn)與無(wú)功能性腫瘤不同前者僅存在MEN（25%），ATRX（25%））的低頻突變面DXX突變則未檢測(cè)到。進(jìn)一步通過(guò)wE聯(lián)合Se和焦函酸測(cè)序驗(yàn)證發(fā)型3a的胰島家瘤有在YV1基因（心CI113Gh官372R）的熱點(diǎn)突變。且功能學(xué)研究提示該突變具有致癌性。一項(xiàng)來(lái)白高加常人群的47例膜島素瘤測(cè)序結(jié)果顯示13強(qiáng)的樣本也存在談熱點(diǎn)突變。基于上述發(fā)現(xiàn)y/基因突變對(duì)于膜島素瘤的診斷具有一定提示意義。此外作為mTOR通路配基因。mTOR抑制劑對(duì)于攜帶該突變的病人可能具有治療價(jià)值。面其他功能性種瘤。如胃泌率瘤，胰高直攜案瘤等因病例罕見(jiàn)，鮮有報(bào)道是影響pFN預(yù)后的重要危購(gòu)因素，21%~80的病人就診時(shí)即可發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移一。Rov等時(shí)20例散發(fā)的無(wú)功能性 pNET轉(zhuǎn)移灶進(jìn)行WE發(fā)現(xiàn)40%的種瘤組織被檢測(cè)出染色質(zhì)重塑基因（sSETD2，ARID1A，CHD8，DVArT1）突變。且部分基因表達(dá)缺失與病人復(fù)發(fā)及生存時(shí)間呈顯著負(fù)相關(guān)。筆者團(tuán)隊(duì)對(duì)轉(zhuǎn)移性pNET研究發(fā)現(xiàn)ARIDIA在275%的原發(fā)灶和30%的轉(zhuǎn)移灶中表達(dá)缺失，且這部分病人5年生存率明顯降低提示染色質(zhì)重塑基因可能具有抑制pNET轉(zhuǎn)移的生物學(xué)功能。
　　1.1.2 基因劑量改變 除了飄動(dòng)基因的突變外區(qū)域乃至染色體水平的大片斷DNA增減同樣在pNEN中具有重要意義。LaPmee等一發(fā)現(xiàn)散發(fā)作pNET中存在高相的非整倍體事件77%的腫瘤至少存在1條染色單體。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，10號(hào)染色體朝發(fā)雜合性缺失（bdhutwypay LOH）合并MEVI雙等位基國(guó)突變失活的亞退病人預(yù)后明是差商11號(hào)染色體LOH合并MEV失活的病人則預(yù)后較好揭示了LOH相關(guān)的新致癌機(jī)制。Yam等0l對(duì)65例來(lái)白R(shí)ADIANT-3臨床試驗(yàn)的pNET進(jìn)行wE聯(lián)合配向測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)染色體局灶的拷貝數(shù)變異（opy amder was∶mEim。CNV）事件少見(jiàn)>93%的樣本存在全染色體或染色體臂水平的L0H與拷貝數(shù)擴(kuò)增。此外，A-D-M基因突變與染色體不穩(wěn)定性升高顯著相關(guān)從基因功能角度推斷可能存在因果關(guān)系。Hoe等叫利用wGSwE分析211例pNET的CVV圖譜發(fā)現(xiàn)拷貝數(shù)擴(kuò)增，缺失及正常的3種模式在無(wú)功能性pNET中均存在。且發(fā)生CNV的病人復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)增高;膜島素瘤則不同無(wú)明顯拷貝數(shù)缺失事件發(fā)生面拷貝數(shù)正常的樣本 yy!基因突變率升高。關(guān)于轉(zhuǎn)移性pNETRny 等0增曾 報(bào)告73%的轉(zhuǎn)移灶被檢測(cè)出CDK.V2A基因的拷貝數(shù)缺失。Ba等調(diào)過(guò)單核苷酸多態(tài)性花片分析直徑≤3 的pNET發(fā)現(xiàn)48個(gè)樣本依據(jù)CNV可聚類(lèi)為臨床特征不同的亞組，頻發(fā)拷貝數(shù)擴(kuò)增，拷貝數(shù)正常的Lou及DAxX ATRX突變的病人肝轉(zhuǎn)移發(fā)生率高達(dá)73%表明拷貝數(shù)檢測(cè)對(duì)臨床風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估具有提示意義。
　　1.2 轉(zhuǎn)錄組
　　轉(zhuǎn)錄組水平檢測(cè)是基因組改變的臉證與延伸。M。i∶與等通過(guò)微陣列芯片檢測(cè)力2例pNEN發(fā)現(xiàn)，mTOR通路抑制基因TSC2，PTEN在多數(shù)原發(fā)灶中表達(dá)下調(diào)支持既往P3K/AkmTOR通路在pEN中活化的研究結(jié)論。此外與無(wú)功能性pNEN相比SSTR2在胰島素瘤樣本中表達(dá)是著降低表明后者可能對(duì)生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物道療反應(yīng)不佳。Hagvik等l利用RNA測(cè)序（RNA 如qpemsim。RNAq）分析散發(fā)，無(wú)功能的pNEN 發(fā)現(xiàn)生物學(xué)行為調(diào)和（Ki-67<s%且無(wú)轉(zhuǎn)移）和不良（Ki-67》9且同時(shí)性轉(zhuǎn)移）的兩個(gè)亞組存在309個(gè)編礙基因的差異表達(dá)上述基因主要調(diào)控淚胞周期和分化提示其對(duì)pNEN 發(fā)展的促進(jìn)作用，面mTB通路相關(guān)基器在不同生物學(xué)行為腔端中的表達(dá)則未見(jiàn)差異。
　　非編礙RNA通常在轉(zhuǎn)錄后水平發(fā)揮調(diào)控作用pNEN 中非編礙RNA研究主要見(jiàn)于mimRNA。一項(xiàng)旱期基于芯片檢測(cè)的報(bào)告是示miroRNA表達(dá)譜《mi-9%9%100 等）差異可用于pNEN與腺泡潤(rùn)胞癌的整別;m次8-20g在胰島素瘤中特異性高表達(dá)∶參與PIEN調(diào)控的m次-2/表達(dá)與Ki-67指數(shù)，肝轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)0I。Tharm等口檢測(cè)754個(gè)miroRNA發(fā)現(xiàn)mi-210表達(dá)與轉(zhuǎn)移事件相關(guān);m次-193 在pNEN組織及血清中均表達(dá)升高提示其可作為潛在的診斷性標(biāo)記物。Lee等評(píng)估m(xù)RNA-27等8個(gè)差異表達(dá)的micrN發(fā)度，m次N4-/9%與pEN我理學(xué)分?jǐn)y，植價(jià)裂像，K=-67指數(shù)顯著相關(guān)且miRMA-19a高表達(dá)病人無(wú)病生存期及總生存期均顯著縮短表明其可能具備預(yù)測(cè)預(yù)后的價(jià)值。
　　1.3 表觀(guān)基因組
　　目前pNEN的表觀(guān)造傳研究主要集中于DNA甲基化修飾。一項(xiàng)基于80個(gè)靜瘤相關(guān)基因的甲基化花片死究是示無(wú)功能性pEN，胰島素耀和置泌素端各自具有特征性的DNA 甲基化圖譜提示上述腫種瘤分子發(fā)病機(jī)制不同以及甲基化特征用于pNEN分型的潛在價(jià)值口。近素Tu為等一利用甲基化老片對(duì)無(wú)功修性NE進(jìn)行全基因組檢測(cè)發(fā)現(xiàn)MEN1綜合征相關(guān)性pNET較散發(fā)性和VHL 綜合征相關(guān)性病例存在更高的Cp心島甲基化發(fā)生率。此外Coaman等曾分析MENI相關(guān)的無(wú)功能性pNEN發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移病例的抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)存在更多的甲基化事件。最近L業(yè)三等問(wèn)分析84例散發(fā)性pNET發(fā)現(xiàn)不同甲基化模式分退間存在特征性基因突變，染色體缺失等變異事件提示表觀(guān)遺傳異常是pNEN發(fā)生以及異質(zhì)性產(chǎn)生的重要原因。既往研究顯示pNEN的高頓異常甲基化基因主要包括RASSF1，HC1，APC，CDKV2A，MGIT MLH1，LNE1 等且絕大數(shù)表現(xiàn)為甲基化水平升高問(wèn)。值得注意的是行使移除鳥(niǎo)嘌呤上烷基功能的DNA損傷修復(fù)基因MGArT被認(rèn)為具有化療指導(dǎo)價(jià)值。因啟動(dòng)子區(qū)甲基化修飾面表達(dá)缺失的NEN 病例對(duì)替莫唑胺等烷化劑治療的有效反應(yīng)率更高。
　　1.4 循環(huán)游離DNARNA
　　液體活檢技術(shù)在種瘤的診斷，監(jiān)測(cè)等方面展現(xiàn)了良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。2018年Boumx 等首次在轉(zhuǎn)移性pNEN病人循環(huán)游離DNA中發(fā)現(xiàn)了種糊特異性基因變異。且變異等位基因頻牢與染色體不穩(wěn)定性隨種瘤進(jìn)展面增高表明基于游離DNA的液體活檢對(duì)評(píng)估腫瘤負(fù)荷和動(dòng)態(tài)路測(cè)種瘤發(fā)展具有潛在價(jià)值以。Mod等1 發(fā)現(xiàn)循環(huán)游離RNA中存在神經(jīng)內(nèi)分泌種瘤特異性轉(zhuǎn)錄本。且基于51個(gè)特征性基因的mRNA開(kāi)發(fā)了新的PCR直漿活檢被術(shù)（N可∶）。牙究證實(shí)。逐被術(shù)比護(hù)強(qiáng)標(biāo)記物CA能更有效抱識(shí)別及預(yù)測(cè) pNEN術(shù)后復(fù)發(fā)減。隨著然來(lái)越多pNEN特征性分子事件被揭示新的液體活檢策略將不斷產(chǎn)生有助于pNEN臨床診治效果的提升。
　　高通量檢測(cè)技術(shù)的普及與隨之面來(lái)的數(shù)據(jù)積累，整合為深入了解pNEN分子特征搭建了高效的研究平臺(tái)。然面受限于pFN的軍見(jiàn)性及異質(zhì)性其關(guān)鍵價(jià)子圖譜遠(yuǎn)被完全認(rèn)識(shí)。此外絕大多數(shù)基于組學(xué)的研究結(jié)果缺少生物學(xué)章義的間述和職證。
　　2. pNE模型研究進(jìn)展
　　疾病模型是用于分子功能，機(jī)制及藥物篩遺等臨床前研究的重要工具。由干對(duì)pNN認(rèn)識(shí)起形較晚，生物學(xué)行為相對(duì)惰性、臨 床病例罕見(jiàn)等因素導(dǎo)致日前成熟的研究模型較其他常見(jiàn)種瘤明顯置乏。
　　2.1 人源淚胞系
　　pNEN人源淚胞系數(shù)目十分有限常見(jiàn)的包括BON-1，QCP-1和CM。BON-1來(lái)源于分泌5-羥色胺的pNEN轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)∶QG-1，CM分別來(lái)源于生長(zhǎng)押瘤和預(yù)島素瘤司。上述淚胞在依維莫司，生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物等pNEN一線(xiàn)藥物的初期療效評(píng)估中發(fā)揮了重要作用。然商這些潤(rùn)胞系構(gòu)建年代較為久遠(yuǎn)隨著對(duì)pNEN認(rèn)識(shí)的深入BON-1和QP-1國(guó)缺乏MEVI突變，SSTR低表達(dá)，增殖過(guò)快等因素代表性受到質(zhì)疑。近來(lái)Beat等（利用胰島素瘤病人的淋巴結(jié)構(gòu)建了增殖活性相對(duì)低《Ki-67 15%~20%）的pNET淚胞系 NT-3提供了更接近臨床實(shí)際的研究模型。隨后Lmy等可在轉(zhuǎn)錄和蛋自水平對(duì)比分析B0N-1（P-1和NT-3的多腫神經(jīng)內(nèi)分泌，上皮標(biāo)記物表達(dá)認(rèn)為前兩者具有分化好的神徑內(nèi)分泌表型可用于pNET基礎(chǔ)研究。最近3D培養(yǎng)系統(tǒng)在pNEN研究中受到關(guān)注該系統(tǒng)能體現(xiàn)復(fù)雜的潤(rùn)胞問(wèn)交互作用以及通過(guò)基質(zhì)潤(rùn)胞共培養(yǎng)反映微環(huán)境對(duì)種瘤的影響較校常規(guī)2D培養(yǎng)更能復(fù)現(xiàn)pNEN的部分生物學(xué)特征0l。Apsil-Monm 等利用3D 系統(tǒng)或功將86%的pNEN 原代潤(rùn)胞培養(yǎng)或具有內(nèi)分泌表型的膜島樣類(lèi)種瘤組織并進(jìn)行了舒尼替尼，依維英司，替英唑胺等常見(jiàn)藥物的評(píng)估實(shí)驗(yàn)使其成為個(gè)體化藥物篩遺的潛在平臺(tái)。日前成熟的pNEN淚胞系均來(lái)白于功能性腫瘤占pNEN比重>60%的無(wú)功能性腫瘤尚缺乏代表性潤(rùn)胞系亟待解決。
　　2.2 人源異種移植PDX模型
　　淚胞系是種瘤研究中最常觀(guān)，簡(jiǎn)便的模型但由于缺少完整微環(huán)境以及多次傳代后可能出現(xiàn)的遺傳變異。導(dǎo)致其難以模擬種糊的實(shí)際情況。人源異種移植（patiat-山riowdxaogafPDX）直接來(lái)源于新鮮潤(rùn)織很大配度上保閥了高代護(hù)端的特征是臨床用藥篩選的可靠工具。Chembrhin等叫對(duì)pNEN的 PDX研究發(fā)現(xiàn)幾經(jīng)傳代該模型仍然維持pNEN的形態(tài)學(xué)特征及特異性基因突變和表達(dá)。進(jìn)一些藥物實(shí)臉是示，部分HDX 出現(xiàn)了臨床常見(jiàn)的依維莫司耐藥現(xiàn)象并發(fā)現(xiàn)新型mTOR 想制劑s取un有b對(duì)依維整司耐藥護(hù)倒仍然產(chǎn)生治療反應(yīng)，體現(xiàn)了PDX良好的臨床前蛋究?jī)r(jià)值。然面pEN的PDX模型構(gòu)建工作卻充滿(mǎn)挑戰(zhàn)。一項(xiàng)早期包含106例神授內(nèi)分泌種瘤（eNEN8例）的PDX牙究發(fā)現(xiàn)，僅7例（eEN3 例）或功種植于小鼠且僅1例發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的擔(dān)囊神徑內(nèi)分泌種瘤可持續(xù)傳代C。同樣Krmra等報(bào)道39例pNET 中僅1例成功構(gòu)建出PDX模型。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)肝謂胞生長(zhǎng)因子酪氨酸激酶變體MET的激活是pNET淚胞能在免疫缺陷小鼠上生長(zhǎng)的關(guān)鍵。pNEN則相對(duì)容易構(gòu)建PDX 日前至少存在19種消化道pNEN的 PDX模型。可能由于pNE較為罕見(jiàn)且組織獲取難度高相關(guān)報(bào)道少見(jiàn)。如何提高pNET建模咸功率以最大限度地發(fā)揮 PDX的臨床轉(zhuǎn)化效用值得深入研究。
　　2.3 基因工程小鼠動(dòng)物模型
　　基因工程小鼠原位模型是日前種類(lèi)最多的pNN研究樹(shù)型。早在20世配80年代，文獻(xiàn)【39-40】分別利用胰島素和前胰高直糖案原基因啟動(dòng)子在個(gè)屬胰島β和a淚胞中表達(dá)SV40病毒大T抗原構(gòu)建了胰島素瘤（RIP-Tmg）和胰高血糖素瘤（Gh2-Te）的轉(zhuǎn)基因模型。隨著對(duì)pNEN分子特征認(rèn)識(shí)的深入CaLbnr等首次報(bào)道通過(guò)全身雜合性敲除 Mm/基因構(gòu)建了MENI綜合征模型（Mm/）該模型小鼠在9~16個(gè)月齡可形成胰島素瘤。此后該團(tuán)隊(duì)又借助ce-LP技術(shù)利用胰島素基因啟動(dòng)子在β潤(rùn)胞條件性敲除 Mm/基因3-8號(hào)外是子構(gòu)建了胰島素瘤模型（Nm1-w）【4。有像的是基利用前胰高血糖素原啟動(dòng)子在a潤(rùn)胞敲除Mm1早期可形威胰高血糖素瘤，胰島素瘤以及兩者的混合瘤>12個(gè)月齡則幾平均為胰島素瘤推測(cè)a謂胞中Mm/缺失可產(chǎn)生分化轉(zhuǎn)移這也許部分解釋了功能性pNEN中瓶島素熵占大多數(shù)的原因。近年來(lái)，K心avchi等利用既往C57B6I背景的BIP-Taug 小屬與A背景個(gè)屬雜交后獲得了無(wú)功能性pNEN模型AB6目6%的個(gè)屬發(fā)生桿物移，與嘴床實(shí)際吻合度較高。除上述幾種主要個(gè)屬模型外其他報(bào)道通過(guò)特異性基國(guó)啟動(dòng)子張合或單貌較人密基碼（如cVhrAu/）皮敲入抑盛基因（如Pro）等構(gòu)建了各具特征的pNN校型。基因工尋個(gè)鼠主要優(yōu)勢(shì)在于具備完善的免疫系統(tǒng)以及能連續(xù)觀(guān)察病情進(jìn)展但也存在建模時(shí)間長(zhǎng)，花費(fèi)大，或功率不穩(wěn)定等缺陷。
　　2.4 類(lèi)器官模型
　　類(lèi)器官模型是干淚胞或器官特異性祖潤(rùn)胞在體外分化，增殖為與親代器官在結(jié)構(gòu)和功能上相似的復(fù)雜3D組織具有自我更新和自我組織的特性（l。近些年該模型因在再生醫(yī)學(xué)、基因治療、個(gè)體化藥物治療等領(lǐng)域應(yīng)用前景廣泛商成為研究熱點(diǎn)。目前類(lèi)器官在pNEN 中的研究鮮有報(bào)道。最近Kawa或等一利用新鮮臨床樣本構(gòu)建了包含25個(gè)神經(jīng)內(nèi)分泌種瘤（1例pNET，2例pNE）的類(lèi)器官庫(kù)。進(jìn)一步通過(guò)個(gè)鼠異體移植培養(yǎng)及多組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)類(lèi)器官模型與臨床樣本在組織病理學(xué)，功能學(xué)特征和遺傳變異方削存在較高的相似性表明I有顳究個(gè)體靜增生物學(xué)行為和評(píng)估特異性邊療策感的重要意義。然面對(duì)于分化好的種窟16例樣本僅建功構(gòu)建了3個(gè)類(lèi)器宜構(gòu)型，可見(jiàn)真正發(fā)擺嘴床實(shí)用價(jià)值還組經(jīng)歷很長(zhǎng)的探索之路。
　　上述pNEN模型各具優(yōu)勢(shì)和不足應(yīng)依據(jù)實(shí)際需要和科研條件選擇最合適的幫究模型。道臨床寶際面言，缺少酸發(fā)性，無(wú)功能的pET模型一定裂度上制約了pE基礎(chǔ)研究以及臨床診行的進(jìn)展。
　　3. 結(jié)語(yǔ)
　　近年來(lái)以二代測(cè)序?yàn)榇淼母咄繖z測(cè)技術(shù)發(fā)展迅猛從基因組，轉(zhuǎn)錄組，表觀(guān)基因組等多個(gè)水平揭示了pNEN的分子特征部分研究結(jié)果已經(jīng)運(yùn)用于臨床診療工作轉(zhuǎn)化意義顯著。開(kāi)發(fā)具有代表性的pNEN模型是推動(dòng)整體研究進(jìn)程的關(guān)鍵pNEN的淚胞系，PDX基因小鼠等傳流研究模型種類(lèi)在近些年得到擴(kuò)充面以類(lèi)器官為代表的新型pNEN模型也顯示了其狼特的優(yōu)勢(shì)值得深入探索。然商pNEN 發(fā)病率低，異質(zhì)性高的特點(diǎn)使其臨床前研究工作在種增學(xué)館域仍處干相對(duì)落后抱位。多中心藥區(qū)境乃至國(guó)際化合作既是保證研究罕見(jiàn)病樣本量的重要模式也為對(duì)比分析不同遺傳背景eEN的特征搭建平臺(tái)。隨著牙究數(shù)據(jù)的快違職署邏級(jí)退化幫究亞型濟(jì)有助干彩統(tǒng)全面抱認(rèn)識(shí)時(shí)NEN的群體異質(zhì)性。此外，利用單退胞測(cè)序等前沿技術(shù)手段從潤(rùn)胞水平嗣述pNEN的個(gè)體異質(zhì)性可能會(huì)帶表實(shí)繁性的進(jìn)展。