鼻炎臨床療效安全性評價及相關(guān)機制的小鼠動物模型實驗研究

發(fā)布時間：

2022-07-15

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專業(yè)提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB細胞庫源細胞、動物實驗、CRO服務(wù)、SCI潤色)

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評價穴位埋線治療變應(yīng)性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的臨床療效和安全性，探討穴位埋線對變應(yīng)性鼻炎機體鼻戮膜神經(jīng)源性炎癥及免疫相關(guān)基因表達譜的調(diào)節(jié)作用，從臨床和基礎(chǔ)兩方面為為穴位埋線治療AR的臨床運用提供科學(xué)依據(jù)

　　目的
　　評價穴位埋線治療變應(yīng)性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的臨床療效和安全性，探討穴位埋線對變應(yīng)性鼻炎機體鼻戮膜神經(jīng)源性炎癥及免疫相關(guān)基因表達譜的調(diào)節(jié)作用，從臨床和基礎(chǔ)兩方面為為穴位埋線治療AR的臨床運用提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法
　　采用隨機、盲法、對照的臨床研究方法，通過EXCEL軟件RAND函數(shù)產(chǎn)生隨機數(shù)字，將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的128名AR受試者分為A組(穴位埋線組)和B組(穴
　　位假埋線組)。兩組均采用相同的取穴方案，每位受試者共接受兩次穴位埋線/假埋線治療，兩次治療間隔2周。以視覺模擬評分量表(visual analogue scale VAS )積分及鼻眼結(jié)膜相關(guān)生活質(zhì)量問卷調(diào)查量表(Rhinocoujunctivitis Quality of Life Questionaire )積分為主要的療效評價指標(biāo)，以鼻內(nèi)鏡檢查，以及血清特異性IgE. IL-4. IL-10. II,-12. IFN一及VCAM-1等實驗室檢測指標(biāo)作為第二療效評價指標(biāo)，治療期間的合并用藥情況、受試者的不良反應(yīng)也將被記錄。在治療前、治療結(jié)束后4周(血清學(xué)指標(biāo)該時間點未行檢測)、治療后8周不同時間點隨訪受試者，評價穴位埋線暇埋線的臨床療效及安全性。
　　以卵清蛋白致敏SD大鼠的方法制作變應(yīng)性鼻炎動物模型，分為治療組A和對照組B，另設(shè)空白組C。每組各15只SD大鼠。A組迎香穴(LI20)埋線，B組不行任何治療。A組大鼠行迎香穴穴位埋線治療。治療后10天，同時取各組大鼠鼻茹膜組織，行HE染色及感覺神經(jīng)}lC P物質(zhì)(substance P,SP)、降鈣素基因相關(guān)膚calcitoningene related peptide, CGRP)和神經(jīng)激膚A(neurokinin A, NKA)的免疫組織化學(xué)染色。觀察以下內(nèi)容:1)造模及治療期間大鼠變應(yīng)性鼻炎相關(guān)的行為學(xué)評分變化;2)光鏡下每張切片以嗜酸性粒細胞浸潤情況為主的炎癥病變情況;3)感覺神經(jīng)膚免疫組化染色情況及積分光密度值(iOD)的測定情況。
　　采用方法2中同樣的造模、分組及干預(yù)方法，每組SD大鼠各3只。A組大鼠第二次迎香穴埋線后取各組大鼠鼻茹膜，經(jīng)RNA抽提、純化、質(zhì)量檢測、cDNA合成后，以第二代功能分類Real-time PCR芯片一The Rat Inflammatory Response&Autoimmunity RTZ ProfilerTM PCR Array(含84個目標(biāo)基因)研究穴位埋線治療后鼻茹膜免疫相關(guān)基因表達譜的改變情況，并以△OCt方法進行三組間兩兩比較的數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)論
　　1.穴位埋線及假埋線均有助于改善變應(yīng)性鼻炎患者的癥狀(VAS評分)及相關(guān)的生活質(zhì)量(RQLQ評分)。但穴位埋線組由于有埋入線體的持續(xù)刺激，該組受試者的癥狀(VAS評分)及相關(guān)的生活質(zhì)量(RQLQ評分)改善較假埋線組更持久。穴位埋線也有助于改善受試者的鼻勤膜顏色、鼻分泌物、下鼻甲的腫脹情況，以及受試者治療前后血清特異性IgE的表達情況，但對參與免疫反應(yīng)的其他細胞因子無改善作用。
　　2.穴位埋線可能通過改善感覺神經(jīng)膚參與的鼻腔神經(jīng)源性炎癥而減輕變應(yīng)性鼻炎的狀況。但穴位埋線治療的AR大鼠模型組，經(jīng)治療，癥狀雖較治療前緩解，但與空白組相比，組間感覺神經(jīng)膚的表達差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義，提示雖然沒有明顯癥狀，但是翁膜的炎癥狀態(tài)仍在持續(xù)。
　　3.利用功能性分類基因芯片技術(shù)有的放矢地對穴位埋線治療的變應(yīng)性鼻炎動物的鼻豁膜的免疫相關(guān)基因表達譜進行差異表達基因的篩選是可行的。與全基因表達譜芯片的研究相比，該方法能夠更為快速、準(zhǔn)確地篩選出目標(biāo)基因，進而為穴位埋線治療變應(yīng)性鼻炎的治療方法提供理論依據(jù)，并為進一步的研究指明方向。
　　關(guān)鍵詞
　　臨床療效評價，臨床安全性評價，動物實驗，鼻炎動物模型，大鼠動物模型