腺嘌呤聯(lián)合番瀉葉可成功建立泄瀉腎陽(yáng)虧虛證動(dòng)物模型，符合泄瀉腎陽(yáng)虧虛證的臨床特點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間：

2022-08-09

來(lái)源：

專業(yè)提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB細(xì)胞庫(kù)源細(xì)胞、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、CRO服務(wù)、SCI潤(rùn)色)

作者：

【如需咨詢購(gòu)買細(xì)胞或技術(shù)服務(wù),請(qǐng)點(diǎn)擊24小時(shí)客服咨詢或留言哦】

閱讀數(shù)：

既往研究發(fā)現(xiàn)，泄瀉動(dòng)物模型的單因素西藥造模僅復(fù)制疾病模型，無(wú)法完全符合中醫(yī)病因病機(jī)理論。而傳統(tǒng)單因素中藥造模雖能反映疾病本質(zhì)，但操作困難，造模周期長(zhǎng)。基于此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用中西藥聯(lián)合的方法來(lái)模擬泄瀉腎陽(yáng)虧虛證病證模型

　　摘要
　　泄瀉是一種常見(jiàn)病和多發(fā)病，常伴隨發(fā)生于糖尿病、潰瘍性結(jié)腸炎、腸易激綜合征等疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，所帶來(lái)的疾病負(fù)擔(dān)在全球范圍內(nèi)呈現(xiàn)逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)。由于其病因、病機(jī)及臨床表現(xiàn)不同，所表現(xiàn)出的中醫(yī)證型存在差異，其中腎陽(yáng)虧虛證為泄瀉常見(jiàn)中醫(yī)證型之一2。探究泄瀉腎陽(yáng)虧虛證的發(fā)生機(jī)制對(duì)于尋求有效的診斷和治療措施具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。目前，西醫(yī)“辨病”與中醫(yī)“辨證”的病證結(jié)合診療模式逐漸在臨床中應(yīng)用。
　　既往研究發(fā)現(xiàn)，泄瀉動(dòng)物模型的單因素西藥造模僅復(fù)制疾病模型，無(wú)法完全符合中醫(yī)病因病機(jī)理論。而傳統(tǒng)單因素中藥造模雖能反映疾病本質(zhì)，但操作困難，造模周期長(zhǎng)。基于此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用中西藥聯(lián)合的方法來(lái)模擬泄瀉腎陽(yáng)虧虛證病證模型。
　　以方測(cè)證作為中醫(yī)證候模型研究的重要手段，可通過(guò)方劑的功效、性質(zhì)以及藥效反應(yīng)來(lái)反證其對(duì)應(yīng)的疾病證候?qū)傩浴Ｋ纳裢枋侵委熜篂a腎陽(yáng)虧虛證的經(jīng)典名方，由《普濟(jì)本事方》中二神丸與五味子散組成，包括補(bǔ)骨脂、肉豆蔻、吳茱萸、五味子、生姜、大棗六味藥，具有溫腎散寒、澀腸止瀉之功。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)四神丸以方測(cè)證對(duì)泄瀉腎陽(yáng)虧虛證小鼠的療效及其藥效機(jī)制進(jìn)行驗(yàn)證，旨在為泄瀉腎陽(yáng)虧虛證的基礎(chǔ)與臨床研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的
　　探索建立泄瀉腎陽(yáng)虧虛證小鼠模型的方法。
　　方法
　　模型建立
　　將20只雄性昆明小鼠隨機(jī)分為空白組和模型組，每組10只。模型組小鼠給予腺嘌呤混懸液50mg/（kg-d）灌胃，每日1次，連續(xù)14日；從第8日起給予番瀉葉水煎液10g（kg-d）灌胃，每日1次，連續(xù)7日。空白組小鼠給予0.4ml無(wú)菌水灌胃，每日1次，連續(xù)14日。觀察兩組小鼠一般行為學(xué)，分別于造模第1、5、9、13日時(shí)測(cè)量小鼠體質(zhì)量、肛溫，計(jì)算腹瀉指數(shù)，造模第14日結(jié)束時(shí)檢測(cè)血清中環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）含量，計(jì)算cAMP/cGMP值。
　　模型驗(yàn)證
　　將另外30只小鼠隨機(jī)分為正常組、模型對(duì)照組和四神丸組，每組10只。模型對(duì)照組和四神丸組按照上述方法造模，造模成功后四神丸組小鼠給予四神丸水煎液5g（kgrd）灌胃，每日2 次，連續(xù)7日；正常組與模型對(duì)照組給予0.35ml無(wú)菌水灌胃，每日2次，連續(xù)7日。比較各組小鼠一般行為學(xué)改變，干預(yù)第1、3、7日時(shí)體質(zhì)量、肛溫、腹瀉指數(shù)，以及干預(yù)7日后血清中cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP值。
　　結(jié)果
　　造模結(jié)果顯示，空白組小鼠精神狀態(tài)及自主活動(dòng)情況均正常，糞便柔軟成形，干濕適中，肛周潔凈。模型組小鼠精神狀態(tài)欠佳，體涼尾冷，爪甲顏色較淺，毛發(fā)稀疏無(wú)光澤，糞便稀軟。與空白組同時(shí)間比較，模型組小鼠造模第9、13日時(shí)體質(zhì)量降低，造模第5、9、13日時(shí)小鼠肛溫降低（P<0.01）。模型組小鼠腹瀉指數(shù)隨著時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸升高，呈時(shí)間依賴性；模型組小鼠血清cAMP含量降低，cGMP含量升高，且cAMPleGMP值降低（P<0.01）。模型驗(yàn)證結(jié)果顯示，四神丸組小鼠精神狀態(tài)較模型組有所恢復(fù)，活動(dòng)靈活，皮毛光澤度提高，爪甲顏色恢復(fù)，糞便稀溏現(xiàn)象減輕。與模型對(duì)照組同時(shí)間比較，在治療第3、7 日時(shí)，四神丸組腹瀉指數(shù)均顯著降低（P<0.05）。給藥7日后小鼠血清cAMP、cGMP水平及cAMP/cGMP值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論
　　腺嘌呤聯(lián)合番瀉葉可成功建立泄瀉腎陽(yáng)虧虛證動(dòng)物模型，符合泄瀉腎陽(yáng)虧虛證的臨床特點(diǎn)。
　　關(guān)鍵詞
　　泄瀉,腎陽(yáng)虧虛證,小鼠動(dòng)物造模,動(dòng)物模型,腺嘌呤,番瀉葉,四神丸