腺嘌呤聯合番瀉葉可成功建立泄瀉腎陽虧虛證動物模型，符合泄瀉腎陽虧虛證的臨床特點

發布時間：

2022-08-09

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既往研究發現，泄瀉動物模型的單因素西藥造模僅復制疾病模型，無法完全符合中醫病因病機理論。而傳統單因素中藥造模雖能反映疾病本質，但操作困難，造模周期長。基于此，本實驗通過采用中西藥聯合的方法來模擬泄瀉腎陽虧虛證病證模型

　　摘要
　　泄瀉是一種常見病和多發病，常伴隨發生于糖尿病、潰瘍性結腸炎、腸易激綜合征等疾病的發生發展過程中，所帶來的疾病負擔在全球范圍內呈現逐年增長趨勢。由于其病因、病機及臨床表現不同，所表現出的中醫證型存在差異，其中腎陽虧虛證為泄瀉常見中醫證型之一2。探究泄瀉腎陽虧虛證的發生機制對于尋求有效的診斷和治療措施具有十分重要的現實意義。目前，西醫“辨病”與中醫“辨證”的病證結合診療模式逐漸在臨床中應用。
　　既往研究發現，泄瀉動物模型的單因素西藥造模僅復制疾病模型，無法完全符合中醫病因病機理論。而傳統單因素中藥造模雖能反映疾病本質，但操作困難，造模周期長。基于此，本實驗通過采用中西藥聯合的方法來模擬泄瀉腎陽虧虛證病證模型。
　　以方測證作為中醫證候模型研究的重要手段，可通過方劑的功效、性質以及藥效反應來反證其對應的疾病證候屬性。四神丸是治療泄瀉腎陽虧虛證的經典名方，由《普濟本事方》中二神丸與五味子散組成，包括補骨脂、肉豆蔻、吳茱萸、五味子、生姜、大棗六味藥，具有溫腎散寒、澀腸止瀉之功。本實驗通過四神丸以方測證對泄瀉腎陽虧虛證小鼠的療效及其藥效機制進行驗證，旨在為泄瀉腎陽虧虛證的基礎與臨床研究提供實驗依據。
　　目的
　　探索建立泄瀉腎陽虧虛證小鼠模型的方法。
　　方法
　　模型建立
　　將20只雄性昆明小鼠隨機分為空白組和模型組，每組10只。模型組小鼠給予腺嘌呤混懸液50mg/（kg-d）灌胃，每日1次，連續14日；從第8日起給予番瀉葉水煎液10g（kg-d）灌胃，每日1次，連續7日。空白組小鼠給予0.4ml無菌水灌胃，每日1次，連續14日。觀察兩組小鼠一般行為學，分別于造模第1、5、9、13日時測量小鼠體質量、肛溫，計算腹瀉指數，造模第14日結束時檢測血清中環磷酸腺苷（cAMP）、環磷酸鳥苷（cGMP）含量，計算cAMP/cGMP值。
　　模型驗證
　　將另外30只小鼠隨機分為正常組、模型對照組和四神丸組，每組10只。模型對照組和四神丸組按照上述方法造模，造模成功后四神丸組小鼠給予四神丸水煎液5g（kgrd）灌胃，每日2 次，連續7日；正常組與模型對照組給予0.35ml無菌水灌胃，每日2次，連續7日。比較各組小鼠一般行為學改變，干預第1、3、7日時體質量、肛溫、腹瀉指數，以及干預7日后血清中cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP值。
　　結果
　　造模結果顯示，空白組小鼠精神狀態及自主活動情況均正常，糞便柔軟成形，干濕適中，肛周潔凈。模型組小鼠精神狀態欠佳，體涼尾冷，爪甲顏色較淺，毛發稀疏無光澤，糞便稀軟。與空白組同時間比較，模型組小鼠造模第9、13日時體質量降低，造模第5、9、13日時小鼠肛溫降低（P<0.01）。模型組小鼠腹瀉指數隨著時間延長而逐漸升高，呈時間依賴性；模型組小鼠血清cAMP含量降低，cGMP含量升高，且cAMPleGMP值降低（P<0.01）。模型驗證結果顯示，四神丸組小鼠精神狀態較模型組有所恢復，活動靈活，皮毛光澤度提高，爪甲顏色恢復，糞便稀溏現象減輕。與模型對照組同時間比較，在治療第3、7 日時，四神丸組腹瀉指數均顯著降低（P<0.05）。給藥7日后小鼠血清cAMP、cGMP水平及cAMP/cGMP值差異均無統計學意義（P>0.05）。
　　結論
　　腺嘌呤聯合番瀉葉可成功建立泄瀉腎陽虧虛證動物模型，符合泄瀉腎陽虧虛證的臨床特點。
　　關鍵詞
　　泄瀉,腎陽虧虛證,小鼠動物造模,動物模型,腺嘌呤,番瀉葉,四神丸